產品名稱:苯丙(bing)氨酸解(jie)氨酶含量檢測
產品型號:BC0210
產品特點:苯丙氨酸解氨酶含量檢測測定原理:PAL催化L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在290nm處有Z大吸收值,通過測定吸光值升高速率計算PAL活性。
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苯丙氨酸解氨酶含量檢測試劑盒說明書
分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度法 貨號: BC0210 規格(ge):50 管/48 樣
苯丙氨酸解氨酶含量檢測產品簡介: PAL(EC4. 3 1 5)廣泛存(cun)在(zai)于各(ge)種植物(wu)和少數微生物(wu)中,是植物(wu)體(ti)內苯丙烷類(lei)代謝的(de)關鍵酶(mei), 與一些重要的(de)次生物(wu)質如木質素(su)、異黃酮類(lei)植保素(su)、黃酮類(lei)色素(su)等合成密切相關,在(zai)植物(wu)正常生長(chang) 發(fa)育和抵(di)御(yu)病菌侵害過(guo)程(cheng)中起重要作用。PAL 催(cui)化 L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂(gui)酸和氨,反式肉桂(gui)酸 在(zai) 290nm 處有大(da)吸(xi)收值(zhi),通過(guo)測(ce)定(ding)吸(xi)光值(zhi)升高速率計算 PAL 活性。
試驗中所需的儀器和試劑: 紫(zi)外分光光度計、水浴鍋、臺式離(li)心機、可調式移液器、1ml 比色皿、研(yan)缽、冰和蒸餾水。 產品內容(rong): 提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保(bao)(bao)存(cun); 試(shi)(shi)劑(ji)一:液體 40mL×1 瓶,4℃保(bao)(bao)存(cun); 試(shi)(shi)劑(ji)二:粉劑(ji)×3 瓶,4℃保(bao)(bao)存(cun),臨用(yong)(yong)前每瓶加入(ru) 4mL 雙(shuang)蒸水充(chong)分溶解待用(yong)(yong);現(xian)配現(xian)用(yong)(yong)。 試(shi)(shi)劑(ji)三:液體 2.5mL×1 瓶,4℃保(bao)(bao)存(cun);
操作步驟:
一、粗(cu)酶(mei)液(ye)提(ti)取(qu): 稱取(qu)約 0.1g 組(zu)織,加(jia)入 1mL 提(ti)取(qu)液(ye)進行冰(bing)(bing)浴(yu)勻漿。10000g,4℃離心 10min,取(qu)上清,置冰(bing)(bing)上待(dai) 測。
二、測定(ding)操作表: 試劑名稱(cheng) 測定(ding)管(guan)(μL) 對照管(guan)(μL) 樣(yang)本 20 試劑一 780 800 試劑二 200 200 混勻(yun),30℃準確水浴 30min 試劑三(san) 40 40 混勻(yun),靜(jing)置 10min 后,用對照管(guan)調零,290nm 處記(ji)錄測定(ding)管(guan)吸光值 A (A=A 測定(ding)管(guan)-A 對照管(guan))。
PAL活性計算: (1)按樣本蛋白濃度計算: 單位的定義:每 mg 組織蛋白在每 ml 反應體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.1 定義為一個 酶活力單位。 PAL(U/mg prot)=A×反應總體積(1040μL)÷樣本體積(20μL)÷反應時間(30min)÷0.1 ÷蛋白 濃度(mg/mL)=17.3×A ÷蛋白濃度(mg/mL) (2)按樣本鮮重計算: 單位的定義:每 g 組織在每 ml 反應體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.1 定義為一個酶活力 單位。 PAL(U/g 鮮重)=A×反應總體積(1040μL)÷﹝樣本鮮重(g)×樣本體積(20μL)÷V 樣總(1mL)﹞ ÷反應時間(30min)÷0.1 =17.3×A ÷樣本鮮重(g)
相關文獻:
《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li,Yang Ding,Xiuli Tang,Guoyi Wang,Shujuan Wu,Xianxian Li,Xiaofei Huang,Tongtong Qu,Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影(ying)響因子:3.032 PMID:
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