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還原型谷胱甘(gan)肽（reduced glutathione, GSH）含(han)量測定(ding)試(shi)劑盒(he)說明書

還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?產品簡介(jie)：

GSH/GSSG是細(xi)胞(bao)內(nei)重要的(de)氧化(hua)還原對(dui)之(zhi)一。因此，測定細(xi)胞(bao)內(nei)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能(neng)夠很好地反映細(xi)胞(bao)所處的(de)氧化(hua)還原狀態。

DTNB與GSH反應(ying)生成(cheng)復合物，在(zai)412nm處有(you)特征吸(xi)收峰(feng)；其吸(xi)光度變化與GSH含(han)量(liang)成(cheng)正比。

還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?試驗中(zhong)所需的(de)儀器和試劑：

可(ke)見分光(guang)光(guang)度計、低溫離心機、水(shui)浴鍋、可(ke)調(diao)節移液器、1ml比色(se)皿、雙(shuang)蒸(zheng)水(shui)

產品內(nei)容(rong)：

試(shi)劑一×1支，充分溶(rong)解于50ml雙蒸(zheng)水(shui)，4℃保(bao)存(cun)

試劑二(er)×1支，充分溶解于(yu)50ml雙(shuang)蒸水中，4℃保(bao)存

試劑(ji)三×1支，充(chong)分(fen)溶解于10ml雙蒸(zheng)水中，4℃避光保存(cun)

還原型谷胱甘肽(GSH)含量檢測試劑盒?操作步驟：

一、樣品(pin)前(qian)處理 ：   

取組織約0.1g，加1ml試劑二，冰上(shang)充(chong)分研磨，8000rpm 4℃離心10min，取上(shang)清。（如上(shang)清不(bu)清澈，再離心3min）

GSH測(ce)定操作(zuo)：

測定前(qian)將試劑一于(yu)25℃水浴(yu)20min

按每100mg組織加(jia)入1000µL生(sheng)理鹽水的比例進行勻漿(jiang)。8000g 4℃離心10分鐘(zhong)，取上清，置冰(bing)上待測。   

對于非哺乳動物組織：按每100mg組織加(jia)入1000µL提取(qu)液(ye)的(de)比(bi)例(li)進行勻漿。8000g 4℃離心10分鐘(zhong)，取(qu)上清，置(zhi)冰上待測。

（2）血清（漿）樣品(pin)：直接檢測。

二、測定操作表：

迅速混勻，于412nm測吸(xi)光值，并記錄第60s的OD值

GSH含量計算：

GSH標準(zhun)曲線(xian)公式(shi)：y=0.0015x+0.0818（x為GSH濃(nong)度，y為吸光值）

液體中GSH（μmol/L）=[（OD測定管-OD空(kong)白(bai)管）-0.0818]/0.0015×樣品稀釋(shi)倍數

組織中GSH計算：

①GSH（μmol/mg prot）=[（OD測(ce)定管-OD空白管）-0.0818]/0.0015×樣品(pin)稀釋倍數÷樣品(pin)蛋白濃度（Cpr）

②GSH（μmol/g mass）=[（OD測定管(guan)-OD空白(bai)管(guan)）-0.0818]/0.0015×樣品(pin)(pin)稀釋倍數÷樣品(pin)(pin)質量（g）

注(zhu)意(yi)事項：

（1）樣(yang)品處(chu)理等過(guo)程均需(xu)要在(zai)冰(bing)上進(jin)行，且須在(zai)當日測定酶活(huo)力，以免影響其活(huo)力測定時，除試劑一外，其它試劑均需(xu)放置在(zai)冰(bing)上；

（2）樣本(ben)測定(ding)前先(xian)取(qu)1-2個樣做預實(shi)驗，如(ru)吸光(guang)值太高（超(chao)過標(biao)準曲(qu)線(xian)范(fan)圍，即y＞0.2時），應先(xian)用試劑二(er)稀釋到適當倍數，使得吸光(guang)值在標(biao)準曲(qu)線(xian)范(fan)圍內。

(3)處理后樣品(pin)不能用于(yu)蛋白濃度測定(ding)