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細胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒

本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙染的方法。細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)發(fa)生(sheng)凋(diao)亡時，染(ran)(ran)色(se)(se)質會(hui)固縮。Hoechst33342可(ke)以(yi)穿透(tou)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜，染(ran)(ran)色(se)(se)后(hou)凋(diao)亡細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)會(hui)比正常(chang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)明顯增強(qiang)。碘化丙啶(ding)(PI)不(bu)能穿透(tou)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜，對于(yu)(yu)具有(you)完(wan)整細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜的正常(chang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)或凋(diao)亡細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)不(bu)能染(ran)(ran)色(se)(se)。而對于(yu)(yu)壞死細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，其(qi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜的完(wan)整性喪失，碘化丙啶(ding)(PI)可(ke)以(yi)染(ran)(ran)色(se)(se)壞死細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)。上述兩種染(ran)(ran)料雙染(ran)(ran)后(hou)，使用流式細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)儀或熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)顯微鏡檢測(ce)時，正常(chang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)為(wei)(wei)弱紅(hong)色(se)(se)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)＋弱藍(lan)色(se)(se)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)，凋(diao)亡細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)為(wei)(wei)弱紅(hong)色(se)(se)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)＋強(qiang)藍(lan)色(se)(se)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)，壞死細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)為(wei)(wei)強(qiang)紅(hong)色(se)(se)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)＋強(qiang)藍(lan)色(se)(se)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)。參考下圖(tu)，左圖(tu)為(wei)(wei)誘(you)(you)導凋(diao)亡前的正常(chang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，右圖(tu)為(wei)(wei)誘(you)(you)導凋(diao)亡后(hou)的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)

染色快速方便(bian)(bian)，兩種染料(liao)的染色僅需20-30分鐘，一步染色即(ji)可(ke)完成。 使(shi)用(yong)方便(bian)(bian)，使(shi)用(yong)流式細(xi)胞儀檢測時，無需稀釋等配制過程，也(ye)無需再準備其它(ta)任(ren)何溶液。 本(ben)試(shi)劑(ji)盒足夠檢測100個(ge)樣品(pin)，每個(ge)樣品(pin)的細(xi)胞數量可(ke)以為1×105-1×106。

細胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒
產品內容： 細胞染色緩沖液 100ml Hoechst染色液 0.5ml PI染色液 0.5ml 說明書 1 份
使用說明：
1. 每個樣品收集約10-100萬細胞于1.5ml離心管內，離心棄上清。細胞沉淀用0.8-1ml細胞染色緩沖液重懸。
2. 加入(ru)5微升Hoechst染(ran)(ran)色(se)(se)(se)液(ye)(ye)(ye)。 3. 加入(ru)5微升PI染(ran)(ran)色(se)(se)(se)液(ye)(ye)(ye)。 4. 混勻，冰浴或(huo)(huo)4℃孵育20-30分鐘(zhong)。 5. 用(yong)流(liu)式(shi)細胞(bao)儀檢(jian)測紅(hong)(hong)色(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)和(he)(he)藍(lan)色(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)。 6. 如(ru)果使(shi)用(yong)熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡檢(jian)測，檢(jian)測前離(li)心沉(chen)淀(dian)細胞(bao)，用(yong)PBS洗滌一(yi)次(ci)，再涂片觀察紅(hong)(hong)色(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)和(he)(he)藍(lan)色(se)(se)(se)熒(ying)光(guang)。對(dui)于貼(tie)壁細胞(bao)使(shi)用(yong)熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡檢(jian)測，可以(yi)不(bu)收集細胞(bao)，直接依次(ci)按照上述比例(li)加入(ru)細胞(bao)染(ran)(ran)色(se)(se)(se)緩沖液(ye)(ye)(ye)、Hoechst染(ran)(ran)色(se)(se)(se)液(ye)(ye)(ye)和(he)(he)PI染(ran)(ran)色(se)(se)(se)液(ye)(ye)(ye)冰浴或(huo)(huo)4℃染(ran)(ran)色(se)(se)(se)20-30分鐘(zhong)。染(ran)(ran)色(se)(se)(se)后PBS洗滌一(yi)次(ci)，再在(zai)熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡下觀查。

注意事項：
需使(shi)用流式(shi)細胞(bao)儀進行紅色和(he)藍色雙熒光檢測(ce)(ce)。也可使(shi)用熒光顯微(wei)鏡(jing)檢測(ce)(ce)。 染色后宜(yi)盡(jin)快檢測(ce)(ce)。 Hoechst 33342對人體有害，碘化丙啶(PI)對人體有刺激性，請注(zhu)意適當防護。 為了您的安全和(he)健康(kang)，請穿(chuan)實驗服并(bing)戴一次(ci)性手套操作。

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