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普魯士藍染色試劑盒（伊紅法）

產品簡介：

含(han)(han)(han)鐵(tie)(tie)血(xue)黃素(su)(hemosiderin)是(shi)一(yi)種血(xue)紅蛋白源性色(se)素(su)，為(wei)金黃色(se)或(huo)棕黃色(se)顆(ke)粒(li)，因其含(han)(han)(han)鐵(tie)(tie)、金黃色(se)，故(gu)稱(cheng)為(wei)含(han)(han)(han)鐵(tie)(tie)血(xue)黃素(su)。當紅細胞(bao)被(bei)巨噬(shi)細胞(bao)吞噬(shi)后，在溶(rong)酶體酶的(de)(de)(de)作用(yong)下，血(xue)紅蛋白被(bei)分解為(wei)不(bu)含(han)(han)(han)鐵(tie)(tie)的(de)(de)(de)橙色(se)血(xue)質(zhi)和含(han)(han)(han)鐵(tie)(tie)的(de)(de)(de)含(han)(han)(han)鐵(tie)(tie)血(xue)黃素(su)。Perls普(pu)魯士藍(lan)反應(ying)(Prussian blue reaction)又(you)稱(cheng)為(wei)含(han)(han)(han)鐵(tie)(tie)血(xue)黃素(su)染色(se)，常(chang)見于(yu)吞噬(shi)細胞(bao)內(nei)或(huo)間質(zhi)內(nei)，主要顯示三價(jia)鹽。Perls普(pu)魯士藍(lan)是(shi)非常(chang)經(jing)典的(de)(de)(de)組織(zhi)化(hua)學反應(ying)，是(shi)顯示組織(zhi)內(nei)三價(jia)鐵(tie)(tie)的(de)(de)(de)一(yi)種敏感、傳統(tong)優良(liang)的(de)(de)(de)方法，：常(chang)用(yong)于(yu)顯示局(ju)部(bu)組織(zhi)內(nei)的(de)(de)(de)各(ge)種出血(xue)性病變，常(chang)見于(yu)吞噬(shi)細胞(bao)內(nei)。

在判斷含鐵(tie)血黃素沉積(ji)時，用Perls反應可以(yi)(yi)得到證(zheng)實, 該(gai)(gai)染(ran)色法(fa)可以(yi)(yi)很好(hao)地(di)區分含鐵(tie)血黃素與(yu)其(qi)他色素。該(gai)(gai)染(ran)色液(ye)穩定性好(hao)、可以(yi)(yi)長期保存、不易產生沉淀(dian)、應用范(fan)圍廣，可以(yi)(yi)進行復染(ran)。 其(qi)復染(ran)液(ye)采用伊紅染(ran)色液(ye)，也是(shi)常用的復染(ran)液(ye)，該(gai)(gai)復染(ran)液(ye)染(ran)色時間較(jiao)核固(gu)紅染(ran)色液(ye)要(yao)短。

普魯士藍染色試劑盒（伊紅法） 

操作(zuo)步驟(zou)（僅供參考）：

（一）石蠟切片染色

1、 切片脫(tuo)蠟水 ① 二甲苯(ben)(Ⅰ) 5～10min ② 二甲苯(ben)(Ⅱ) 5～10min ③無水乙醇(chun)(chun)(Ⅰ)（可(ke)選） 3～5min ④無水乙醇(chun)(chun)(Ⅱ)（可(ke)選） 3～5min ⑤95%的乙醇(chun)(chun) 3～5min ⑥90%的乙醇(chun)(chun) 3～5min ⑦80%的乙醇(chun)(chun) 3～5min ⑧自來(lai)水或(huo)蒸餾水沖洗(xi)(Ⅰ) 1～3min ⑨自來(lai)水或(huo)蒸餾水沖洗(xi)(Ⅱ) 1～3min

2、染(ran)色(se) ①切片入 Perls stain（見注意(yi)事(shi)項 6） 15～30min ②蒸餾水(shui)充分沖洗 5～10min ③伊紅染(ran)色(se)液(ye)淡染(ran)細胞核 15～30s ④自來水(shui)沖洗 1～5s。

3、脫水(shui)、透明(ming)、封固(gu) ①90%乙(yi)醇 10～20s ②95%乙(yi)醇(Ⅰ) 1～2min ③95%乙(yi)醇(Ⅱ) 1～2min ④ 無(wu)水(shui)乙(yi)醇(Ⅰ) 2～3min ⑤無(wu)水(shui)乙(yi)醇(Ⅱ) 2～3min ⑥ 二甲苯(ben)(Ⅰ) 2～3min ⑦二甲苯(ben)(Ⅱ) 2～3min ⑧ 二甲苯(ben)(Ⅲ) 2～3min ⑨中性樹(shu)脂(zhi)封片。

（二）冰凍切片染色

1、 無(wu)需脫蠟，直接迅速用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)沖洗 2～3min。

2、 染色(se)、脫蠟、透明、封(feng)固步驟同石蠟切片的染色(se)步驟。

（三）細胞染色

1、4%多(duo)聚甲(jia)醛(quan)固(gu)定 10～20min。

2、自來水沖洗(xi) 2 次(ci)，每次(ci) 2min。

3、蒸餾水(shui)沖洗 2 次，每次 2min。

4、染(ran)色、脫蠟、透明、封固步驟(zou)同石蠟切(qie)片的染(ran)色步驟(zou)。

染色結果：含鐵(tie)血黃素或三價鐵(tie) 藍色細胞核、其他組織(zhi) 紅色陰性(xing)對照（可選）取(qu)相同(tong)連續(xu)切片脫蠟(la)水。置于 5%的(de)草酸中，孵育(yu) 2-6h 后，經 Perla stain，需要(yao)步驟同(tong)上。結果為陰性(xing)。

注意事項： 1、 切(qie)片(pian)脫蠟(la)應盡量干凈(jing)。 2、 組織固定常采用(yong) 10%的(de)(de)(de)中(zhong)性福爾(er)馬(ma)林，經普(pu)通福爾(er)馬(ma)林長期固定后，組織會有損傷。 3、 臨(lin)用(yong)前(qian)取 A1、A2 液等量混合(he)，即為(wei)試劑（A），現配現用(yong)，不可提前(qian)配制。 4、整(zheng)個(ge)(ge)操作過程中(zhong)容器(qi)要干凈(jing)，避(bi)免(mian)(mian)使用(yong)金屬鐵(tie)(tie)制品(pin)，洗(xi)切(qie)片(pian)和(he)容器(qi)時(shi)以蒸餾水為(wei)宜(yi)，因普(pu)通水內含鐵(tie)(tie)質(zhi)。 5、避(bi)免(mian)(mian)使用(yong)酸性固定劑，鉻酸鹽處(chu)理也會妨礙鐵(tie)(tie)的(de)(de)(de)保存。 6、Perls stain 染(ran)色時(shi)，應根(gen)據樣(yang)品(pin)情(qing)況(kuang)調整(zheng)著(zhu)色時(shi)間。 7、所(suo)有檢查切(qie)片(pian)都(dou)應使用(yong)同一(yi)個(ge)(ge)陽(yang)(yang)性對照切(qie)片(pian),選擇適合(he)的(de)(de)(de)對照非常重要.尸檢肺組織是(shi)一(yi)個(ge)(ge)很(hen)好(hao)的(de)(de)(de)對照,包含相當數量的(de)(de)(de)鐵(tie)(tie)陽(yang)(yang)性巨(ju)噬細胞(bao)(bao)(心(xin)衰細胞(bao)(bao)). 8、95%乙醇、90%乙醇應經常更換新液. 9、 冰凍切(qie)片(pian)和(he)細胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)染(ran)色,應根(gen)據具體情(qing)況(kuang)摸(mo)索實驗(yan)(yan)條件. 10、 為(wei)了(le)您的(de)(de)(de)健康(kang)和(he)安全,請穿實驗(yan)(yan)服并戴一(yi)次(ci)性手套操作.