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Lipopolysaccharides From Escherichia coli 055:B5

L8880 脂(zhi)多糖(tang)產品(pin)進口分裝(zhuang)的(de)，脂(zhi)多糖(tang)效價(jia)大于(yu)等于(yu)500000 EU每mg，但(dan)每批產品(pin)效價(jia)有一定(ding)差(cha)別(bie)，我們產品(pin)主要是提供脂(zhi)多糖(tang)的(de)活性，相(xiang)關應用方面的(de)實驗需要客(ke)戶自己摸索和(he)優化。

脂多糖（LPS）說明：

①脂(zhi)質(zhi)和多(duo)(duo)(duo)糖(tang)(tang)的(de)(de)復(fu)合物(wu)；②為(wei)革(ge)蘭氏陰性細菌細胞(bao)壁(bi)的(de)(de)主(zhu)要成分，脂(zhi)多(duo)(duo)(duo)糖(tang)(tang)是(shi)內毒(du)素的(de)(de)重要群特異(yi)性抗原(O抗原)。脂(zhi)多(duo)(duo)(duo)糖(tang)(tang)由三部分組成。脂(zhi)質(zhi)A(Lipid A)為(wei)構成內毒(du)素活性的(de)(de)糖(tang)(tang)脂(zhi)，以共價鍵聯結到雜(za)多(duo)(duo)(duo)糖(tang)(tang)鏈，有兩部分：一是(shi)核心多(duo)(duo)(duo)糖(tang)(tang)，在有關(guan)的(de)(de)株內是(shi)恒定的(de)(de)；另一O特異(yi)性鏈(O-specific chain)是(shi)高度可變(bian)的(de)(de)。大(da)腸桿菌的(de)(de)脂(zhi)多(duo)(duo)(duo)糖(tang)(tang)在實(shi)驗室免疫(yi)學中是(shi)常用的(de)(de)B細胞(bao)促分裂因(yin)子即多(duo)(duo)(duo)克隆活化(hua)因(yin)子(polyclonal activator)。可用于細胞(bao)培養。

脂多糖（LPS）簡介：

脂多糖，英文名稱Lipopolysaccharides，簡稱LPS，是革蘭氏陰性細菌細胞壁中的一種*成分，位于細胞壁的外層并暴露于非莢膜細菌的細胞表面，有利于維持細胞外膜的完整性，保護細菌免受膽汁鹽和脂類抗生素的破壞。結構上，脂多糖由類脂A、核心多糖和O-多糖側鏈組成。其中類脂質A是構成細菌內毒素的主要成分，決定其毒性強弱；而O-多糖側鏈在不同細菌間是高度變化的，特異性決定細菌的血清型。
LPS可以引起免疫刺激的級聯反應和機體的毒性病理生理活動，包括釋放內毒素引起感染性休克從而導致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。正是LPS與機體免疫機能的密切關系，生命科學研究常常提取LPS進行相關的研究，如闡明LPS的結構，代謝，免疫學，生理學，毒性，生物合成途徑；誘導生長促進因子如白介素的合成與分泌；誘導疾病研究的動物模型如炎癥反應，急性肺損傷。將LPS分別與FITC、TRITC或2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBSA)反應即可得到FITC、TRITC或TNP標記的LPS，主要用于非胸腺依賴性B細胞對細菌LPS的免疫應答研究。。
LPS可(ke)(ke)通過TCA、酚(fen)、酚(fen)-氯fang-石(shi)油醚等方法(fa)(fa)制(zhi)備，其中后一種方法(fa)(fa)為粗提取(qu)法(fa)(fa)。TCA和酚(fen)提取(qu)得(de)到(dao)的(de)(de)LPS在(zai)結構上(shang)、電泳(yong)圖譜(pu)和內(nei)毒素水平均較相似(si)，不同之處在(zai)于(yu)含有的(de)(de)核(he)酸和蛋(dan)白(bai)質(zhi)殘留量不同，TCA法(fa)(fa)得(de)到(dao)的(de)(de)LPS含有約(yue)2%的(de)(de)RNA和10%的(de)(de)變(bian)性(xing)蛋(dan)白(bai)。酚(fen)法(fa)(fa)提取(qu)的(de)(de)LPS含有達60%的(de)(de)RNA和少于(yu)1%的(de)(de)蛋(dan)白(bai)。用凝(ning)膠過濾層析可(ke)(ke)除去酚(fen)提取(qu)LPS中的(de)(de)殘留蛋(dan)白(bai)，但是仍會留下約(yue)10-20%的(de)(de)核(he)酸。進(jin)一步用離子交換層析法(fa)(fa)純化可(ke)(ke)得(de)到(dao)＜1%蛋(dan)白(bai)和＜1%RNA的(de)(de)LPS。

本品(pin)來源于(yu)(yu)(yu)血清型(xing)大腸桿菌O55:B55，用苯法提取而得。其(qi)內毒素水平不少于(yu)(yu)(yu)500,000 EU (endotoxin units)/mg，經分析，1ng相當于(yu)(yu)(yu)5EU（鱟試劑法）和(he)10EU（顯(xian)色(se)法）。LPS O55:B55可用于(yu)(yu)(yu)刺激(ji)人腹(fu)腔(qiang)巨噬細(xi)胞（1ng/ml）以及(ji)馬腹(fu)腔(qiang)巨噬細(xi)胞的活動（1-100ng/ml）。

來源：Escherichia coli 055:B5

溶解性:可(ke)溶(rong)于水(10mg/ml)或細胞培養(yang)基(1mg/ml)，產生渾濁淡黃色溶(rong)液，溶(rong)于鹽溶(rong)液經旋渦(wo)振(zhen)蕩并加熱到70-80℃可(ke)得到一種濃度更高的LPS溶(rong)液（20mg/ml）。

使用方法：

1. LPS儲存液的(de)配制(zhi)，用于(yu)細胞(bao)培養相關實驗：將(jiang)1mg LPS重懸于(yu)1ml無(wu)菌平(ping)衡鹽(yan)溶液或細胞(bao)培養基(ji)，輕輕旋渦(wo)振(zhen)蕩直粉末*溶解(jie)，即得到1mg/ml的(de)儲存液。此(ci)儲存液可進一步用無(wu)菌平(ping)衡鹽(yan)或細胞(bao)培養基(ji)稀釋需要(yao)的(de)工(gong)作濃度。

2. LPS儲(chu)存(cun)(cun)(cun)液(ye)的保存(cun)(cun)(cun)：本儲(chu)存(cun)(cun)(cun)液(ye)（1mg/ml）可放(fang)在4℃保存(cun)(cun)(cun)，約(yue)一個月穩(wen)定；也(ye)可分裝(zhuang)成單(dan)次用量后放(fang)到-20℃，2年穩(wen)定。避免反(fan)復(fu)凍融。

【注意】：1）LPS溶(rong)液(ye)應(ying)儲存于硅烷(wan)化容器(qi)內，因為LPS可(ke)(ke)吸(xi)附于塑料或(huo)某些玻璃(li)器(qi)皿，尤其當其濃度(du)＜0.1mg/ml時。但(dan)當LPS濃度(du)大于1mg/ml時，上(shang)述吸(xi)附則可(ke)(ke)忽(hu)略不計(ji)。2）如使用玻璃(li)器(qi)皿，則需旋渦振蕩(dang)LPS溶(rong)液(ye)少30min，以(yi)重溶(rong)被(bei)吸(xi)附溶(rong)質。

注意事項

為(wei)了您的安(an)全和健(jian)康(kang)，請穿實(shi)驗服并戴一次性(xing)手套操(cao)作(zuo)。