色8久久人人97超碰香蕉987_亚洲乱码日产精品M_18禁美女裸体网站无遮挡_日韩精品无码免费专区午夜不卡

總巰基含量檢測試劑盒

生物體內巰(qiu)基(ji)主要包括谷胱甘(gan)肽巰(qiu)基(ji)和(he)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)(zhi)巰(qiu)基(ji)。前者(zhe)不僅能夠修復(fu)氧化損傷(shang)的(de)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)(zhi)，而且參(can)與活性(xing)氧清除，后者(zhe)對于維持蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)(zhi)構象具有重(zhong)要作用。通過測定(ding)總(zong)巰(qiu)基(ji)含(han)量(liang)和(he) GSH 含(han)量(liang)，能夠間接測定(ding)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)(zhi)巰(qiu)基(ji)含(han)量(liang)。

巰(qiu)基(ji)基(ji)團與 5,5’-二硫代-雙-硝基(ji)苯甲酸（DTNB）反應，生成黃色化(hua)合物，在 412nm 處有吸收峰(feng)。

總巰基含量檢測試劑盒

樣品的制備：

1. 按照組織(zhi)質量（g）：提取(qu)(qu)(qu)液體積(ji)(mL)為 1：5~10 的比例（建議(yi)稱(cheng)取(qu)(qu)(qu)約 0.1g 組織(zhi)，加入 1mL 提取(qu)(qu)(qu)液）進行(xing)冰(bing)浴勻漿(jiang)，然后 8000g，4℃離心 10min，取(qu)(qu)(qu)上(shang)清(qing)，置冰(bing)上(shang)待測。

2. 血清，培養液(ye)：直接(jie)測定(ding)。

操作步驟：

1、 分光(guang)光(guang)度計(ji)/酶標(biao)儀預熱 30min，調節波長(chang) 412nm，蒸餾(liu)水調零(ling)。

2、操作表對照(zhao)管 測(ce)定(ding)管樣品（μL） 40 40 試劑一（μL） 150 150 試劑二（μL） 10 H2O（μL） 10 混勻(yun)，25℃靜置 10min，于微(wei)量石(shi)英比色皿/96 孔板，測(ce)定(ding) 412nm 吸光(guang)值。ΔA=A 測(ce)定(ding)-A 對照(zhao)。

計算公式：

a. 用微量石英(ying)比色皿(min)測定的計(ji)算公(gong)式如下總(zong)巰基(ji)標準曲(qu)線：y = 1.7236 x，R 2 = 0.9994

1. 組織：

（1）按(an)樣本重量計算總巰基含量（μmol/g）= 1.7236 ?A ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）= 2.9×ΔA÷W

（2）按樣(yang)(yang)本蛋白濃度計(ji)算總巰(qiu)基含量（μmol/mg prot）= 1.7236 ?A ×V 反(fan)總÷(V 樣(yang)(yang)×Cpr) = 2.9×ΔA÷Cpr

2. 血(xue)清、培養液：

總(zong)(zong)巰基含量（μmol/L）= 1.7236 ?A ×V 反(fan)總(zong)(zong)÷V 樣(yang)(yang)×103 =2900×ΔA V 反(fan)總(zong)(zong)：反(fan)應(ying)總(zong)(zong)體積(ji)，0.2mL；V 樣(yang)(yang)：反(fan)應(ying)中樣(yang)(yang)品體積(ji)，0.04mL；V 樣(yang)(yang)總(zong)(zong)：加入提取液(ye)體積(ji)， 1mL；W：樣(yang)(yang)品質量，g ；Cpr：樣(yang)(yang)本蛋白濃度，mg/mL；103 ：1mmol/L=103 μmol/ L

b.用 96 孔(kong)板測定的計算公式如下

總(zong)巰基標準曲線(xian)：y = 0.8618x，R 2 = 0.9994 1.

組織(zhi)：（1）按樣(yang)本重量計算總(zong)(zong)巰基含(han)量（μmol/g）= 0.8618 ?A ×V 反(fan)總(zong)(zong)÷（V 樣(yang)÷V 樣(yang)總(zong)(zong)×W）=5.8×ΔA÷W

（2）按樣(yang)(yang)本蛋白濃(nong)度計算總巰基含量（μmol/mg prot）= 0.8618 ?A ×V 反總÷（V 樣(yang)(yang)×Cpr）=5.8×ΔA÷Cpr

2. 血清(qing)、培養液(ye)(ye)：總(zong)巰基含量(liang)（μmol/L）= 0.8618 ?A ×V 反(fan)(fan)總(zong)÷V 樣(yang)(yang)×103 =5800×ΔA V 反(fan)(fan)總(zong)：反(fan)(fan)應總(zong)體積，0.2mL；V 樣(yang)(yang)：反(fan)(fan)應中(zhong)樣(yang)(yang)品體積，0.04mL；V 樣(yang)(yang)總(zong)：加入提取液(ye)(ye)體積， 1mL；W：樣(yang)(yang)品質(zhi)量(liang)，g ；Cpr：樣(yang)(yang)本蛋白濃度(du)，mg/mL；103 ：1mmol/ L=103 μmol/ L