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MTT溶液（0.5） 染色液

MTT是一種檢測細胞存活(huo)和生長(chang)的(de)方法。MTT實驗(yan)原理為活細(xi)(xi)胞(bao)線粒體中的(de)琥珀酸脫氫酶能使外(wai)源性(xing)MTT還(huan)原為水不溶性(xing)的(de)藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在(zai)細(xi)(xi)胞(bao)中，而死細(xi)(xi)胞(bao)無此功能。二甲基亞(ya)砜（DMSO）能溶解細(xi)(xi)胞(bao)中的(de)甲瓚，用酶聯(lian)免疫(yi)檢測儀(yi)在(zai)490nm波長處測定其光吸收值(zhi)，可間接反映(ying)活細(xi)(xi)胞(bao)數量。
在一定(ding)細胞(bao)數范圍內，MTT結晶形成的(de)(de)量(liang)與(yu)細(xi)胞(bao)數成正比。根據測得的(de)(de)吸(xi)光度(du)值(OD值)，來判斷活(huo)(huo)細(xi)胞(bao)數量(liang)，OD值越大(da)，細(xi)胞(bao)活(huo)(huo)性(xing)越強(如果(guo)是測藥物毒(du)性(xing)，則表示藥物毒(du)性(xing)越小)。該方法已(yi)廣泛用于一(yi)些生物活(huo)(huo)性(xing)因(yin)子的(de)(de)活(huo)(huo)性(xing)檢測、大(da)規模(mo)的(de)(de)抗腫瘤(liu)藥物篩(shai)選、細(xi)胞(bao)毒(du)性(xing)試驗以(yi)及腫瘤(liu)放射敏(min)感性(xing)測定等。它的(de)(de)特點(dian)是靈敏(min)度(du)高(gao)、經濟。
MTT通常用于.細(xi)胞(bao)增殖及細(xi)胞(bao)活性測定以及藥物(也包括其他處理方式如放(fang)射線照射)對體外培養的細(xi)胞(bao)毒性的測定。
缺點：由于MTT經還原所產(chan)(chan)生的(de)甲瓚產(chan)(chan)物不(bu)溶于水，需被(bei)溶解后(hou)才(cai)能檢測。這不(bu)僅使工作量增加，也(ye)會對實驗(yan)結果的(de)準確(que)性產(chan)(chan)生影響(xiang)，而且溶解甲的(de)有(you)機(ji)溶劑對實驗(yan)者(zhe)也(ye)有(you)損害。
注意事項：
1、在配制和保存的過程(cheng)中，容器用(yong)鋁箔紙包住。
2、配成的MTT需要無菌，MTT對菌很(hen)敏感(gan)
3、MTT一般現用(yong)現配(pei)，過濾后(hou)4度避光保(bao)存(cun)兩周內(nei)(個(ge)人曾做過4度避光保(bao)存(cun)4周的MTT溶液，效果(guo)仍然不錯)有效，或配(pei)制成(cheng)5mg/ml保(bao)存(cun)在-20度長期保(bao)存(cun)，避免反復凍融，小劑(ji)量分裝，用(yong)避光袋或是黑紙、錫箔紙包(bao)住避光以(yi)免分解。當MTT變為灰綠色時就不能再用(yong)。
4、MTT有致癌性，用(yong)的時候小(xiao)心,有條件帶那種透明(ming)的簿(bu)膜手(shou)套.
通常，此法中的MTT濃度為5mg/ml。因(yin)此，可以稱取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅(hong)的培養基中(zhong)，用0.22μm濾(lv)膜過濾(lv)以(yi)除去溶液里的細菌，放(fang)4℃ 避光保存(cun)即可(ke)。在配制和保存(cun)的過程中(zhong)，容器用鋁(lv)箔紙包住(zhu)。

MTT溶液（0.5） 染色液

 
參考文獻：
《Sphingomyelin synthase 2 promotes H2O2-induced endothelial dysfunction by activating the Wnt/β-catenin signaling pathway》 作者:Panpan Zhang,Lingyue Hua,Huan Hou, Xingyue Du,Zhiqiang He, Menghan Liu, Xiaojuan Hu, Nianlong Yan 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30272329
《Epigenetically upregulated oncoprotein PLCE1 drives esophageal carcinoma angiogenesis and proliferation via activating the PI-PLCε-NF-κB signaling pathway and VEGF-C/ Bcl-2 expression》 作者:Yunzhao Chen, Dandan Wang, Hao Peng, Xi Chen, Xueping Han, Jie Yu, Wenjie Wang, Lirong Liang, Zheng Liu, Yi Zheng, Jianming Hu, Lan Yang, Jun Li, Hong Zhou, Xiaobin Cui and Feng Li 期刊:Molecular Cancer 影響因子:10.679 PMID:30609930