產品名稱:異(yi)丙基(ji)-β-D-硫(liu)代(dai)半乳糖苷 IPTG
產品型號:I8070
產品特點:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG貨號:I8070規格:1g/5g/100g分子式:C9H18O5S分子量:238.31儲存條件:2-8℃純度:≥99.0%外觀(性狀):白色結晶性粉末單位:瓶
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異丙(bing)基-β-D-硫代半乳糖(tang)苷(gan) IPTG
貨號:I8070
規格:1g/5g/100g
異(yi)丙基(ji)-β-D-硫代半乳(ru)糖(tang)苷,英(ying)文名稱IPTG。為(wei)安(an)慰性誘導(dao)物(wu),X-gal為(wei)生色底(di)物(wu),二者共同用(yong)于藍(lan)白斑篩(shai)選。IPTG可(ke)誘導(dao)載體lac操縱子DNA區段合成β-半乳(ru)糖(tang)苷酶(mei)氨基(ji)端(duan)片(pian)段,該片(pian)段可(ke)與宿主細(xi)胞編碼的缺陷型β-半乳(ru)糖(tang)苷酶(mei)實(shi)現基(ji)因內互(hu)補(bu)(α互(hu)補(bu))。實(shi)現α互(hu)補(bu)的細(xi)菌(jun)(jun)暴(bao)露IPTG,鋪在含有(you)X-gal生色底(di)物(wu)的培養基(ji)上,可(ke)形成藍(lan)色菌(jun)(jun)落。外源DNA插入質(zhi)粒的多(duo)克隆位點(dian)后可(ke)破壞α互(hu)補(bu)作用(yong),將產(chan)生白色菌(jun)(jun)落。
特性:純度 :≥99.0% (TLC) 熔點:110-114℃
濕度(%):≤1.0 pH (5%, 水)25℃:5-7
比旋光度 (1%, 水):-34.0--29.0
溶解性:IPTG貯存液,先在8ml蒸餾水中溶解2g,定溶10ml,用0.22um濾器過濾除菌,貯存于-20℃。
異丙(bing)基-β-D-硫代半乳糖苷(gan) IPTG
異(yi)丙基-β-D-硫代半(ban)(ban)乳(ru)糖(tang)苷,英(ying)文(wen)名稱IPTG。為(wei)安慰性誘導(dao)物(wu),X-gal為(wei)生(sheng)色底物(wu),二者(zhe)共(gong)同用于藍(lan)白(bai)斑篩選。IPTG可(ke)誘導(dao)載體lac操縱子(zi)DNA區段合(he)成β-半(ban)(ban)乳(ru)糖(tang)苷酶氨基端片(pian)段,該片(pian)段可(ke)與(yu)宿主(zhu)細胞(bao)編碼的(de)缺陷型β-半(ban)(ban)乳(ru)糖(tang)苷酶實現(xian)基因(yin)內互補(bu)(α互補(bu))。實現(xian)α互補(bu)的(de)細菌暴露IPTG,鋪在含有(you)X-gal生(sheng)色底物(wu)的(de)培(pei)養基上,可(ke)形成藍(lan)色菌落(luo)(luo)。外源DNA插(cha)入質粒的(de)多克隆位點后可(ke)破(po)壞α互補(bu)作(zuo)用,將產生(sheng)白(bai)色菌落(luo)(luo)。
特性:純度 :≥99.0% (TLC) 熔點:110-114℃
濕度(%):≤1.0 pH (5%, 水)25℃:5-7
比旋光度 (1%, 水):-34.0--29.0
溶解(jie)性(xing):IPTG貯(zhu)存(cun)(cun)液,先(xian)在8ml蒸餾水中溶解(jie)2g,定溶10ml,用0.22um濾(lv)器過濾(lv)除菌,貯(zhu)存(cun)(cun)于(yu)-20℃。
IPTG誘導原理
先
E.coli的乳糖操縱子(元)含Z、Y及A三個結構基因,分別編碼半乳糖苷酶、透酶和乙酰基轉移酶,此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調節?基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白,后者與O序列結合,使操縱子(元)受阻遏而處于關閉狀態。在啟動序列P上游還有一個分解(代謝)物基因激活蛋白(CAP)結合位點。由P序列、O序列和CAP結合位點共同構成lac操縱子的調控區,三個酶的編碼基因即由同一調控區調節,實現基因產物的協調表達。
其次
在(zai)沒有(you)乳(ru)(ru)糖存(cun)在(zai)時,lac操縱(zong)(zong)子(元)處于(yu)阻(zu)遏(e)狀態。此(ci)時,I序(xu)(xu)列(lie)在(zai)PI啟動(dong)序(xu)(xu)列(lie)操縱(zong)(zong)下表達的Lac阻(zu)遏(e)蛋(dan)白與(yu)O序(xu)(xu)列(lie)結合(he),阻(zu)礙RNA聚合(he)酶與(yu)P序(xu)(xu)列(lie)結合(he),抑制轉(zhuan)錄(lu)起動(dong)。當有(you)乳(ru)(ru)糖存(cun)在(zai)時,lac操縱(zong)(zong)子(元)即可(ke)被(bei)誘導(dao)。在(zai)這個操縱(zong)(zong)子(元)體系中,真正的誘導(dao)劑并非乳(ru)(ru)糖本身。乳(ru)(ru)糖進(jin)入細(xi)胞,經b-半(ban)乳(ru)(ru)糖苷酶催化,轉(zhuan)變為半(ban)乳(ru)(ru)糖。后者作為一種誘導(dao)劑分子結合(he)阻(zu)遏(e)蛋(dan)白,使蛋(dan)白構象變化,導(dao)致阻(zu)遏(e)蛋(dan)白與(yu)O序(xu)(xu)列(lie)解離(li)、發(fa)生轉(zhuan)錄(lu)。異(yi)丙基硫半(ban)乳(ru)(ru)糖苷(IPTG)是一種作用*的誘導(dao)劑,不被(bei)細(xi)菌(jun)代謝而十分穩定,因此(ci)被(bei)實驗室(shi)廣(guang)泛應(ying)用。
參考文獻:
《Engineering an electroactive Escherichia coli for the microbial electrosynthesis of succinate from glucose and CO2》 作者:Zaiqiang Wu,Junsong Wang, Jun Liu, Yan Wang, Changhao Bi, Xueli Zhang 期刊(kan):Microbial Cell Factories 影(ying)響因(yin)子:4.402 PMID:30691454
《Engineering an electroactive Escherichia coli for the microbial electrosynthesis of succinate by increasing the intracellular FAD pool》 作者(zhe):Zaiqiang Wu,Junsong Wang,Xueli Zhang,Changhao Bi 期(qi)刊:Biochemical Engineering Journal 影響(xiang)因子:3.371 PMID:
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