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DNA電泳試劑 DNAGREEN  核酸染料

貨號 ：G7140

規格：0.5ml (10000×)

保存：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。

注意 ：本產品屬于微量核酸檢測試劑，使用時請按照說明書操作。

產(chan)品簡介(jie) ：

目前常見的替(ti)代(dai) EB 的核(he)酸染料 SYBR Green I （屬(shu)于花氰類染料） 雖然毒性(xing)比 EB 低(di)、 靈敏(min)度(du)比 EB 高，但(dan)由于其化(hua)學穩(wen)(wen)定性(xing)差；此外，SYBR Green I 在電泳(yong)過程(cheng)中(zhong)能(neng)在 DNA 分(fen)(fen)子間(jian)移位(wei)，很容易使 DNA 條帶(dai)模糊和(he)扭曲，電泳(yong)清晰(xi)度(du)和(he)分(fen)(fen)辨率下(xia)降。所(suo)以在實際(ji)應用中(zhong)依然不能(neng)有效替(ti)代(dai) EB。本產品是(shi)同時具有 EB 穩(wen)(wen)定性(xing)和(he) SYBR Green I 低(di)毒性(xing)的新性(xing)核(he)酸染料，其特點如下(xia)：

1.  低毒。其主要(yao)成分未(wei)發現對人體有致癌性、未(wei)被列入有毒有害(hai)品，有利于保(bao)護使用者(zhe)的健康和保(bao)護日益(yi)惡化的環(huan)境。

2.  靈敏(min)。檢(jian)測靈敏(min)度跟 EB 相當，能(neng)滿(man)足常規核(he)酸電泳實驗要求。

3.  穩(wen)定。對(dui)光、水和熱的穩(wen)定性跟 EB 相(xiang)當，可加入瓊脂(zhi)糖凝膠中(zhong)反(fan)復熔化(hua)。

4.  無(wu)分子間(jian)位移現象(xiang)。不會(hui)出現 SYBR 染料常見的條帶(dai)模糊和扭(niu)曲現象(xiang)。

5.  使(shi)用(yong)方(fang)法多樣。既可以加(jia)入熔化的膠(jiao)中，也(ye)可以電泳后染色，還可用(yong)于 PAGE。

6.  跟(gen)各種常(chang)用的核(he)酸(suan)電泳緩沖(chong)液（如 SuperBuffer-2、TBE、TAE）兼(jian)容，但在 SuperBuffer-2 和 TBE 中背景低(di)。

7.  觀察時不(bu)需要任何(he)額外的(de)儀器設備或 UV 光源，可以使用現成的(de)觀察 EB 的(de) 300nm UV。

8.  ;可用于 RNA 染色(也呈(cheng)綠(lv)色)。

9.  DNA 或 RNA ;濃(nong)度較(jiao)高(gao)時還(huan)可以直接在日(ri)光(guang)下觀察 （需要將膠放在黑色(se)背景下） 。 由(you)于避免了 UV 對 DNA的傷害(hai)，尤(you)其適(shi)用于膠回收實(shi)驗。

使用(yong)方(fang)法:

電泳中(zhong)染色：

本(ben)方法(fa)是將 DNAGREEN 直接(jie)加入溶化的(de)凝膠(jiao)中使用(yong)，只適(shi)(shi)用(yong)于瓊脂糖凝膠(jiao)電泳，不適(shi)(shi)用(yong)于 PAGE。

1.  將 DNAGREEN 直(zhi)接加(jia)(jia)入(ru)到融化的瓊(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang)(tang)(tang)凝(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)中(zhong)， 每 100mL 凝(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)加(jia)(jia) 310 uL DNAGREEN， 混合均勻后(hou)倒膠(jiao)(jiao)。瓊(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang)(tang)(tang)凝(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)中(zhong)不能含任何其(qi)他染料（如 EB 和 SYBR Green I，否則(ze)會相(xiang)互干擾(rao)） 。在 100mL 瓊(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang)(tang)(tang)凝(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)中(zhong)加(jia)(jia)入(ru) DNAGREEN 的量(liang)不要(yao)超過(guo) 10 uL，否則(ze)背景增強。注意：一定要(yao)保證瓊(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang)(tang)(tang)*熔化，尤其(qi)是在*次(ci)熔化膠(jiao)(jiao)的時(shi)候(hou)，否則(ze)未熔化的小顆粒將產生(sheng)跟染料相(xiang)同(tong)的熒光(guang)。

2.  將 DNA 樣品(pin)與 DNA 上樣液(ye)按比例混合后(hou)上樣。注意：一(yi)定要(yao)使用(yong)不(bu)含(han) SDS 等去污劑(ji)的上樣液(ye)，否則SDS 會跟(gen)染料結合，極(ji)大地降低(di)靈敏度。

3.  上樣后電泳，電泳參數(shu)同常規的電泳。

4.  電泳結束后(hou)在 300 nm 左右 的 UV 下(xia)觀察。

注意(yi)：不要使用(yong)波長為(wei) 260 nm 或 360 nm 的(de) UV，否則(ze)檢測靈敏度(du)會降(jiang)低。如果 DNA 或 RNA 濃度(du)較高，還可(ke)以直接在日光下(xia)直接觀察(cha)（需要將膠(jiao)放在黑(hei)色背景下(xia)） ，

避免 UV 對 DNA 的傷害，尤其適(shi)用于膠回收實(shi)驗。

5.  用配(pei)置了 520-550 nm 濾(lv)(lv)光片（一般呈黃(huang)色或深黃(huang)色）的(de)相(xiang)機拍照。注意：不(bu)要(yao)使用與 EB 兼容的(de)紅(hong)色濾(lv)(lv)光片（它能(neng)阻(zu)擋(dang) 520-550 nm 的(de)光） 。如(ru)果(guo)能(neng)再加(jia)上能(neng)濾(lv)(lv)去 UV 的(de)濾(lv)(lv)光片，效果(guo)會更好。

6.  后續 Southern、轉(zhuan)膜(mo)或 DNA 膠(jiao)回收實驗按(an)常規操作進行。

電(dian)泳后染(ran)色：

本(ben)方法是在電(dian)泳后對 DNA 進行染(ran)色，適用(yong)于瓊脂(zhi)糖凝膠電(dian)泳和 PAGE。但該方法需要單獨的(de)染(ran)色處理，染(ran)料用(yong)量較大，不推薦(jian)用(yong)于瓊脂(zhi)糖凝膠的(de)染(ran)色。

1.  按照(zhao)常規(gui)方法(fa)進行電泳(yong)。

2.  用去離(li)子水(shui)(shui)將 DNAGREEN 稀釋 500 倍后（100 mL 水(shui)(shui)需要加 0.2 mL DNAGREEN） ，將凝膠(jiao)放入，室溫下(xia)搖晃染色 30 分鐘（對瓊脂糖(tang)凝膠(jiao)）或 15 分鐘（對 PAGE） 。

3.  用水脫色 10-30 分(fen)鐘(zhong)，具體時間(jian)需根據背景(jing)強弱決定。

注意：電(dian)泳后(hou)染色(se)液(ye)可(ke)以反復使用次數。

疑(yi)難(nan)解答: 

Q：本產品可(ke)否用于 RNA 染色(se)？

A： 可以，不論 RNA 是在(zai)甲醛變性(xing)膠(jiao)中電泳(yong)，還是在(zai)普通(tong)的 SuperBuffer-2、TBE 或(huo) TAE 膠(jiao)中電泳(yong)，RNA染色(se)(se)后在(zai) 300nm 下都跟 DNA 一樣呈綠色(se)(se)，

Q：本(ben)產品是否可(ke)以加入上樣液中進行染色？

A：不行，本產(chan)品(pin)只能直接(jie)加入(ru)凝(ning)膠中進行染色或電泳(yong)后再染色。

Q：為(wei)何前端（靠近正極）的 DNA 條帶很淡或(huo)根本看(kan)不見？

A：跟 EB 一(yi)樣，電(dian)(dian)泳時(shi) DNAGREEN 朝負極方向移動(dong)，當(dang)前端的 DNA（小片段）進(jin)入沒有 DNAGREEN的區域時(shi)，已經結合(he)的染(ran)料(liao)(liao)分子會逐(zhu)漸從 DNA 分子上脫落，所(suo)以條帶會變淡或根本看不見。解決辦法之(zhi)一(yi)是(shi)縮短電(dian)(dian)泳時(shi)間或電(dian)(dian)泳后再染(ran)色；之(zhi)二(er)是(shi)在每 100 mL 電(dian)(dian)泳緩沖(chong)液中補加 3-5uL 染(ran)料(liao)(liao)。

Q：本產品(pin)在哪種緩沖液(ye)中(zhong)效果好？

A：DNAGREEN 染料在(zai)不(bu)同緩沖(chong)液中背(bei)景熒光(guang)強度不(bu)同，從弱到強的順序是：SuperBuffer-2、TBE、TAE。

在背景較(jiao)強(qiang)的緩沖液體(ti)中，可以適當降(jiang)低(di)染(ran)料的用量，比如(ru) 100mL 膠中加 3-5 uL。濃度需要稍做(zuo)摸索(suo)。

Q：用 SYBR 染色(se)的 DNA 在電泳時為何容易發生條帶模糊和(he)扭(niu)曲現(xian)象(xiang)？

A：SYBR 染(ran)料一般與(yu) DNA 的(de)(de)小溝結(jie)合，但在常規電泳條件下該結(jie)合并不牢固，染(ran)料分(fen)子可以在標記的(de)(de)和未

標記(ji)的(de)(de) DNA 分子之間(jian)轉(zhuan)移，使 DNA 分子的(de)(de)泳動(dong)速度時(shi)快（無(wu)(wu)染(ran)料結合時(shi)）時(shi)慢(man)（有染(ran)料結合時(shi)） ，發生條(tiao)帶(dai)模糊和(he)扭曲(qu)現象。嵌入型染(ran)料（如 EB 和(he)本(ben)產(chan)品）與 DNA 結合牢固，則無(wu)(wu)此現象。

相關產品(pin) ：

T1050 5×TBE  緩沖(chong)液

T1060 50×TAE  緩沖(chong)液(ye)

E1020 EB 溶液 (10mg/ml)

A1020 40% 丙(bing)烯酰胺(an)（ 19:1 ）

D1010 6×DNA Lodding Buffer

M1060  D2000 DNA Ladder

PC1120 2×Taq PCR MasterMix ( 含染料）

DNA電泳試劑 DNAGREEN  核(he)酸染(ran)料訂購說明：
1、絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發貨。 
2、部分非常用產品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后，將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

DNA電泳試劑 DNAGREEN  核酸染料運輸說明：
1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品：常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。