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solarbio RPMI1640 細胞培養試劑

紅細胞裂解液是一種比較溫和的(de)紅(hong)細(xi)胞去除(chu)方法。既不損傷有核細(xi)胞又能(neng)充分的(de)去除(chu)紅(hong)細(xi)胞。經紅(hong)細(xi)胞裂(lie)解液裂(lie)解得到(dao)的(de)組織細(xi)胞中不含紅(hong)細(xi)胞，可進(jin)一步用于原代(dai)細(xi)胞培(pei)養(yang)、細(xi)胞融合(he)、核酸與蛋白的(de)分離和提取等。

紅細胞裂解的原理

紅(hong)細(xi)(xi)胞(bao)表面上有紅(hong)細(xi)(xi)胞(bao)專屬的(de)(de)表面抗(kang)原(yuan)(yuan)，當(dang)裂(lie)解(jie)液中含(han)可以(yi)攻擊(ji)(ji)特(te)定(ding)紅(hong)細(xi)(xi)胞(bao)表面細(xi)(xi)胞(bao)抗(kang)原(yuan)(yuan)的(de)(de)酶的(de)(de)時(shi)候，就(jiu)只會造成紅(hong)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)變形，生物通道擴大、膨脹(zhang)、裂(lie)解(jie)，而(er)不會攻擊(ji)(ji)其他細(xi)(xi)胞(bao)。另(ling)外紅(hong)細(xi)(xi)胞(bao)有自己(ji)的(de)(de)電(dian)負(fu)性(xing)、滲透脆性(xing)、懸浮穩定(ding)性(xing)、這都是區別于(yu)其他種(zhong)類細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)區別點(dian)。紅(hong)細(xi)(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液就(jiu)是利用這些特(te)性(xing)裂(lie)解(jie)紅(hong)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)。

紅細胞裂解液的使用說明

1. 1倍體積(ji)的新(xin)鮮(xian)全血(xue)，加入(ru)3倍體積(ji)的紅(hong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液。如1ml新(xin)鮮(xian)全血(xue)加入(ru)3ml紅(hong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液，輕輕渦旋或(huo)顛倒混勻。

2. 冰上放(fang)置15分(fen)鐘(zhong)，其間輕輕渦旋混勻兩次，紅細胞裂(lie)解后，溶液應該是(shi)清亮(liang)透明的。

3. 收集細胞：4℃，450×g離心10分鐘以沉淀白(bai)細胞，小(xiao)心吸棄上清液。

4. 向白細胞沉淀中加(jia)入(ru)(ru)兩(liang)倍體(ti)積的(de)紅細胞裂解液(ye)，輕輕渦旋(xuan)充(chong)分重(zhong)懸白細胞。如起始(shi)血液(ye)為1ml，則(ze)加(jia)入(ru)(ru)2ml的(de)紅細胞裂解液(ye)。

5. 4℃，450×g離心(xin)10分鐘沉(chen)淀白細胞，小心(xin)并*吸去上清液(ye)。

6. 重(zhong)懸細胞(bao)，用于后續實驗；如提取RNA，于此(ci)步開始使用DEPC水(shui)配制的溶液(ye)進行操作(zuo)。

紅細胞裂解液的配置方法

取100 μl抗(kang)凝全血(xue)，加(jia)2 ml應(ying)用(yong)(yong)液3#，混(hun)(hun)勻(yun)(yun)15～20 s；加(jia)2 ml應(ying)用(yong)(yong)液2#，混(hun)(hun)勻(yun)(yun)15～20 s；加(jia)4 ml應(ying)用(yong)(yong)液1#，混(hun)(hun)勻(yun)(yun)15～20 s；300×g離心(xin)2 min，棄上清；收集沉(chen)淀，加(jia)PBS緩(huan)沖液，制成白(bai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)懸液，備用(yong)(yong)。（這種紅細(xi)(xi)胞(bao)(bao)裂解法滿足了白(bai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)流式細(xi)(xi)胞(bao)(bao)儀檢測分選(xuan)要(yao)求，價格低廉(lian)，是一(yi)種簡便快捷、經濟實(shi)用(yong)(yong)的白(bai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)純化(hua)分選(xuan)方法。）

相關文獻：

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