產品名稱：線(xian)粒體(ti)提取試劑盒
產品型號：SM0020
產品報價：
產品特點：亞細胞器提取試劑盒線粒體提取試劑盒貨號：SM0020規格：50T/100T保存：四周內使用可 4℃儲存，長期保存請置于-20℃
免費咨詢(xun)：010-50973159
線粒體提取試劑盒
貨號：SM0020
規格：50T/100T
保存：四周內使用可 4℃儲(chu)存，長(chang)期保存請置于(yu)-20℃
產品內容：
| 組份 | SM0020 -50 | SM0020-100 |
| Lysis Buffer | 50 ml | 100 ml |
| Mito-Wash Buffer | 25 ml | 50 ml |
| Store Buffer | 5 ml | 10 ml |
產品簡介：
用于(yu)從(cong)動物(wu)細(xi)胞或組織中分離出完整而純化的線(xian)(xian)粒(li)體。適合于(yu)動物(wu)軟組織（肝或腦組織）和(he)硬(ying)組織（肌(ji)肉）以(yi)及(ji)培養細(xi)胞的線(xian)(xian)粒(li)體的制(zhi)備(bei)。其制(zhi)備(bei)物(wu)產量高，可以(yi)被用于(yu)細(xi)胞凋亡、信號傳遞、代謝和(he)蛋白組學等的研究。
操作步驟：
1. 樣本處理
a. 組織勻漿：稱取 100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等，PBS或生理鹽水沖洗，洗凈血水，濾紙吸干，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內。加入 1.0 mL冰預冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨組織 20 次；
b. 培養細胞勻漿：消化細胞，PBS洗滌，800g離心 5~10 min收集細胞，計數。每次提取需要 5×10 7 個細胞，加入 1.0 mL冰預冷的Lysis Buffer重懸細胞，將細胞懸液轉移到小容量玻璃勻漿器內，0℃冰浴研磨 30~40 次。
2. 將組織或細胞勻漿物轉移到離心管，4℃，1000g 離心 5 min。
3. 取上清，轉移新的離心管中，4℃，1000g 再次離心 5 min。
4. 取上清，轉移新的離心管中，4℃， 12,000 g 離心 10 min。離心后的上清含胞漿成分，可從中提取胞漿蛋白。將上清轉移到新離心管，線粒體沉淀在管底。
5. 往線粒體沉淀中加入 0.5 mL Wash Buffer 重懸線粒體沉淀，4℃，1000 g 離心 5 min。
6. 取上清，轉移新的離心管中，4℃， 12,000 g 離心 10 min。棄上清，高純度的線粒體沉淀在管底。
7. 用 50 -100μL Store Buffer 或合適的反應(ying)緩沖液(ye)重懸線粒體沉淀，立即使(shi)用或-70℃保存。
注意事項：
1. 為保證獲得完整的線粒體，務必做到：*，全程低溫操作；第二，快速；第三，在不破壞亞細胞器的情況下破碎細胞，這是制備線粒體的關鍵環節。與組織塊相比，培養細胞特別是貼壁培養細胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁，因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴密的研杵上下研磨培養細胞。
2. 以離心力g計算正確的離心速度，不同的離心機可據此計算離心速度。
3. 進行Western Blot和 2D-膠電泳，可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體。
轉速與離心力換算：
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G為離心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍數來表示；
;[rpm]２ 即：轉(zhuan)速的平方(fang)； R為(wei)半徑，單(dan)位為(wei)厘米。
相關產品：
P1020 1×PBS ， PH7.2-7.4 ， 0.01M
P1015 4× 蛋白上樣緩沖液（含 DTT ）
SN0020 細胞核(he)提取試(shi)劑盒
線粒體提取試劑盒
| 相關同類產品： |
發郵件給我們：3193328036@qq.com
