色8久久人人97超碰香蕉987_亚洲乱码日产精品M_18禁美女裸体网站无遮挡_日韩精品无码免费专区午夜不卡

脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒（微量法）說明(ming)書(shu)

貨號:BC0255

規(gui)格: 100T/96S

脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒（微量法）?產(chan)品簡介：

HYP是(shi)機體(ti)膠原蛋白主(zhu)要(yao)成分(fen)之一(yi)，膠原蛋白大(da)多(duo)分(fen)布于皮(pi)膚、腱、軟骨和血管等，因此HYP含量是反映膠(jiao)原組(zu)織代(dai)謝及纖維化程度(du)的一項重要指標。

樣品經水解產生(sheng)游離(li)的HYP，進(jin)一補被氯(lv)胺(an)T氧(yang)(yang)化(hua)(hua)，氧(yang)(yang)化(hua)(hua)產物(wu)與對二甲氨基苯甲醛反應，產生(sheng)紅色化(hua)(hua)合物(wu)，在560nm處有特征(zheng)吸收峰(feng)。通過測定樣品(pin)水解液560nm吸光值，可(ke)計算HYP含量。

產(chan)品(pin)內容：

組織提取液(ye)：6mol/L鹽酸，自備。濃鹽酸(suan)：H2O（V/V）= 1:1，室(shi)溫保存； 

細胞提取液：液體100mL×1 瓶(ping)，4 ℃保存；  

試劑一：液體(ti)10mL×1 瓶，4 ℃避(bi)光保存(cun)；  

試劑二：液體(ti)10mL×1 瓶(ping)，4 ℃避光保存(cun)。

脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒（微量法）操作步驟：

一、羥脯氨酸提取：  

1. 組織：取約0.2g 樣品于玻璃(li)管(guan)，加入2mL的組(zu)提取(qu)液，置于110℃烘箱，水解(jie)612小時(shi)，16000rpm，25℃，離心20min，用提取(qu)液定容2mL，取上清待(dai)測(ce)。  

2.  細(xi)胞：取約500 萬(wan)個細胞，加入1mL 的細胞(bao)提取液，于高(gao)壓消(xiao)毒器(qi)中15 磅保(bao)持30min，自然降壓后(hou)待測。

二、測定操作(zuo)：

羥脯(fu)氨酸含量計算：

用微(wei)量比(bi)色皿測定(ding)的(de)計算公式:

標(biao)準(zhun)曲(qu)線：y=64.875x+ 0.0251，R²=0.9991  

（1）按組織計算  

HYP含量（mg/g） =（A₅₆₀-0.0251）÷64.875×V 反總(zong)÷(V 樣÷V 樣總(zong)×W)  ;

                         =0.154×（A₅₆₀-0.0251）÷W  

（3）按細胞(bao)計算：

HYP含量（mg/10⁴cell)= （A₅₆₀-0.0251）÷64.875×V 反總÷V 樣(yang)×V 樣(yang)總÷細胞(bao)數量（萬(wan)個）

=0.077×（A₅₆₀-0.0251）÷細(xi)胞數(shu)量(liang)（萬個）

V反總：反應體系(xi)總體積，0.3mL； V樣：反應中(zhong)樣本體積，0.06mL；V樣(yang)總(zong)：加入提取液體積，mL； W：樣(yang)本(ben)質量，g。

用96孔板測定的計算(suan)公(gong)式如下:

標準曲線：y=32.4375x+ 0.0251，R²=0.9991  

（1）按組織(zhi)計算  

HYP含(han)量（mg/g） =（A₅₆₀-0.0251）÷32.4375×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)  

            ;             =0.308×（A₅₆₀-0.0251）÷W  

（3）按(an)細胞計算(suan)：

HYP含量（mg/10⁴cell)= （A₅₆₀-0.0251）÷32.4375×V 反(fan)總÷V 樣(yang)×;V 樣(yang)總÷細胞(bao)數(shu)量（萬(wan)個）

=0.154×（A₅₆₀-0.0251）÷細胞數(shu)量（萬個）  

V反總：反應體系總體積，0.3mL； V樣(yang)：反應中樣(yang)本體積，0.06mL；V樣總：加入提取液體積，mL； W：樣本(ben)質量，g。

注意(yi)事項：

1、OD值大于0.8，樣品(pin)適(shi)當稀釋(shi)再測定(ding)，注意計算公式里乘以(yi)稀(xi)釋倍數。

2、試劑有一定的毒(du)性，請操作時做好防(fang)護措施，防(fang)止吸入或與皮膚接(jie)觸。