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Solarbio 大鼠脾臟淋巴細胞分離液試劑盒

【檢(jian)驗方法】
全過程樣本(ben)、試劑及實驗(yan)環境(jing)均需在 20±2℃的(de)條件下進(jin)行。
1. 先制備(bei)脾(pi)臟(zang)組(zu)織單細(xi)胞懸(xuan)液，制備(bei)方(fang)法詳見“脾(pi)臟(zang)組(zu)織單細(xi)胞懸(xuan)液制備(bei)技術”。
2. 取一支 15ml 離心管，加入與脾臟組織單細胞(bao)懸液(ye)等量的分(fen)離液(ye)（注(zhu)：分(fen)離液(ye)少(shao)不(bu)得少(shao)于 3ml）。
3. 用吸管小(xiao)心(xin)吸取脾臟(zang)(zang)組織(zhi)單(dan)細胞懸液(ye)加于(yu)分離(li)(li)液(ye)液(ye)面上，400-500g，離(li)(li)心(xin) 20-30min。（注：根(gen)據脾臟(zang)(zang)組織(zhi)單(dan)細胞懸液(ye)量(liang)確定離(li)(li)心(xin)條件，脾臟(zang)(zang)組織(zhi)單(dan)細胞懸液(ye)量(liang)越大，離(li)(li)心(xin)力越大，離(li)(li)心(xin)時間(jian)越長(chang)，具體離(li)(li)心(xin)條件需客戶自行摸索，以達到分離(li)(li)效果）。
4. 離心后，此(ci)時離心管中(zhong)由(you)上下分為(wei)四層。層為(wei)稀(xi)釋液層。第(di)(di)二層為(wei)環狀乳白(bai)色淋巴細(xi)胞層。第(di)(di)三層為(wei)透明(ming)分離液層。第(di)(di)四層為(wei)紅(hong)細(xi)胞層。
5. 用吸管小心吸取第(di)二層環狀乳白(bai)色淋巴細胞層到另一 15ml 離心管中(zhong)，向離心管中(zhong)加(jia)入10ml 清洗液混勻(yun)細胞。
6. 250g，離心 10min。
7. 棄上清。
8. 用吸管以 5ml 清洗液重(zhong)懸所得細胞。
9. 250g，離(li)心 10min。
10. 重(zhong)復 7、8、9，棄上清后以 0.5ml 后續實驗所需(xu)相應液體重(zhong)懸(xuan)細胞。
 

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【注(zhu)意事(shi)項(xiang)】
1. 全過程樣(yang)本、試劑及實(shi)驗環境(jing)均(jun)需在 20±2℃的(de)條(tiao)件下進行(xing)。為獲得實(shi)驗結果(guo)，在取(qu)樣(yang) 2h 內進行(xing)實(shi)驗，樣(yang)品存放時間(jian)越長，細(xi)胞分離效果(guo)越差。樣(yang)品放置超過 6h 后(hou)分離效果(guo)更差甚不能(neng)達到分離目的(de)。
2. 本實驗不要(yao)使用高(gao)聚合材質（如聚苯乙烯）的塑料(liao)制品(pin)，應使用無靜(jing)電、低靜(jing)電離心管及未經堿處理(li)過后的玻璃(li)制品(pin)，因為靜(jing)電作(zuo)用將導致細胞貼壁、堿處理(li)的玻璃(li)表(biao)面會變成毛面，影(ying)響細胞分離效果(guo)。
3. 吸取過多(duo)的(de)淋(lin)巴細胞層及分離(li)液層會導致(zhi)分離(li)液交界處的(de)粒(li)細胞被吸出從而使混雜的(de)粒(li)細胞數量增(zeng)加。
4. 分(fen)離液(ye)用量大于脾(pi)臟(zang)組(zu)織單(dan)細胞懸液(ye)樣(yang)本時，分(fen)離效果更佳。

產品特(te)點：

1 產(chan)品經過(guo)逐瓶燈(deng)檢基本可控(kong)制其(qi)中不(bu)含不(bu)溶(rong)性微粒(li)物(wu)；
2. 產品原料具有生(sheng)物安全(quan)性和可追(zhui)溯性；
3 產品全生產過程*按照國家(jia) GMP 標準操作流程進行；
4. 產(chan)品(pin)包裝(zhuang)瓶的安全性(xing)及可追溯性(xing)；
5. 產(chan)品采用高溫高壓滅菌及(ji) 0.04 微米(mi)的一次性過濾雙重微生(sheng)物(wu)及(ji)病毒去除