產品名稱:A8350-2.5 -Agarose L.M.P 低(di)熔點瓊脂糖
產品型號:A8350
產品特點:A8350-2.5 -Agarose L.M.P 低熔點瓊脂糖⊙應用:·具有更高的分辨率,適用于DNA/RNA電泳。 ·65℃以下凝膠融化,適宜膠回收。 · 在37℃以下保持流動,適用于凝膠內進行的酶促反應、組織培養、細胞克隆以及病毒空斑實驗
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A8350-2.5 -Agarose L.M.P 低熔點瓊脂糖
CAS 39346-81-1
外觀 白色粉末(mo)
EEO ≤ 0.10
凝膠溫度 26℃-30℃ (1.5% gel)
融(rong)膠(jiao)溫度(du) ≤65℃ (1.5% gel)
溶解性 無色清澈膠液
水(shui)分 ≤ 10%
凝膠強度 ≥200g/cm2(1.0% gel)
硫(liu)化(hua)物(SO42-) ≤ 0.10%
灰(hui)分 ≤ 0.5%
DNA酶(mei) & RNA酶(mei) 不得(de)檢出
蛋白酶 不得檢出(chu)
正確的加熱方式對瓊脂糖的充分溶解和凝結關重要,在此,我們提供以下幾點作為正確制備瓊脂糖凝膠的操作參考。
1.瓊脂糖加熱(re)溶解所需時間短。
2.瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang)在TAE或者TBE緩沖液中不(bu)(bu)(bu)溶(rong)解,加熱時,瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang)顆粒水化形(xing)成溶(rong)液,水化是時間(jian)依賴的,不(bu)(bu)(bu)同(tong)的瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang)水化點不(bu)(bu)(bu)同(tong)。瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang)純(chun)度高,超微顆粒,非常(chang)適(shi)合作為(wei)電泳(yong)實驗載體。對(dui)比于其(qi)他的瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang),瓊(qiong)(qiong)脂(zhi)(zhi)糖(tang)水化速度快(kuai),使(shi)用者無需煮(zhu)沸過長時間(jian),否則易導致(zhi)膠(jiao)液濃稠,不(bu)(bu)(bu)利于混勻,凝膠(jiao)后易破(po)損(sun)。
3.熔(rong)點(dian)范(fan)圍:62-68℃ ,凝膠溫度(du) ( 1.0%):24-29℃
瓊脂糖凝膠制備
用(yong)1×TBE溶液配制1%濃度瓊脂糖凝膠
1.用(yong)于(yu)制備(bei)膠液的(de)錐形(xing)瓶體(ti)積應為膠液體(ti)積的(de)2-4倍,緩慢向緩沖液中加入瓊脂糖,邊(bian)加邊(bian)攪拌(ban),防止瓊脂糖聚(ju)集。記錄(lu)瓶體(ti)和溶(rong)液總重量。
2.微波(bo)爐(lu)高火加(jia)熱(re)30s,根據配(pei)制(zhi)的溶液體積調整加(jia)熱(re)時(shi)間(jian)。加(jia)熱(re)時(shi)間(jian)與微波(bo)爐(lu)、瓶體大小和(he)瓊脂(zhi)糖(tang)濃度有關。
3.搖勻瓊(qiong)脂糖溶液(ye)。
4.再(zai)次高火加熱30s,搖勻瓊脂(zhi)糖溶液。
5.將溶液再次放回微波爐(lu),高火加熱沸騰(teng)(大約10-35s)。接觸移動時瓊(qiong)脂(zhi)糖膠液可能會劇烈沸騰(teng),小心操作,避免(mian)燙傷(shang)。從微波爐(lu)拿出后,室溫冷卻(que)1-2min,輕輕搖晃使液體(ti)里(li)的氣泡溢出。
6.重(zhong)新放(fang)回微波爐,高火加熱,使(shi)之沸騰約15s,觀(guan)察瓊脂(zhi)糖(tang)的溶解狀態,如(ru)果仍(reng)有顆粒存在,重(zhong)復該(gai)步(bu)驟直所有晶體全(quan)部溶解。
7.待瓊脂(zhi)糖*溶解成液體(ti),重(zhong)新稱量(liang)總重(zhong)量(liang),計算蒸(zheng)發液體(ti)量(liang),用水補齊原始重(zhong)量(liang),搖(yao)勻液體(ti)。
8.建議膠液冷(leng)卻(que)50-55℃時(shi)灌膠,有利于凝(ning)膠孔徑均勻(yun)*,不于損(sun)傷(shang)制膠儀。灌膠前輕輕搖晃瓊(qiong)脂(zhi)糖溶液,釋放膠液中殘(can)存(cun)的(de)氣泡。
9.向制膠槽中灌(guan)膠,一般膠的厚度3-5mm,灌(guan)膠后盡量排除(chu)梳孔之間或底(di)部的氣(qi)泡(pao)。
10.在室溫放置(zhi)(30-45min)使膠(jiao)充分凝結。
如果要制備不同濃度和不同體積的凝膠,請注意以下兩點:
1.在(zai)凝膠溶液煮沸前少進行2次搖勻(yun)。
2.膠(jiao)(jiao)液(ye)沸騰后,每隔10-15s觀察一(yi)次膠(jiao)(jiao)液(ye)溶解程(cheng)度(間(jian)隔時(shi)間(jian)取決(jue)于(yu)膠(jiao)(jiao)液(ye)濃(nong)度和體(ti)積)。
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