色8久久人人97超碰香蕉987_亚洲乱码日产精品M_18禁美女裸体网站无遮挡_日韩精品无码免费专区午夜不卡

羥脯氨酸(HYP)含量檢測試劑盒

HYP 是機體膠原蛋白主要成分之一，膠原蛋白大(da)多分布于皮膚、腱、軟骨和血(xue)管等，因此(ci) HYP 含(han)量(liang)是反(fan)映膠原組織代謝及纖維化程(cheng)度的(de)一項(xiang)重要指標。樣(yang)品經水解產(chan)生(sheng)游離(li)的(de) HYP，進一補被氯胺 T 氧化，氧化產(chan)物(wu)與(yu)對二甲氨基苯jia醛(quan)反(fan)應，產(chan)生(sheng)紅色化合物(wu)，在 560nm 處有特(te)征吸收峰。通(tong)過測定樣(yang)品水解液 560nm 吸光值，可計算 HYP 含(han)量(liang)。

一、羥脯(fu)(fu)氨酸提取(qu)(qu)： 1. 組(zu)織：取(qu)(qu)約 0.5g 樣(yang)品(pin)于(yu)玻璃(li)管，加入(ru) 5mL 的組(zu)提取(qu)(qu)液(ye)，置(zhi)于(yu) 110℃烘箱(xiang)，水(shui)解 6 12 小(xiao)時，16000rpm，25℃，離(li)心(xin) 20min，用(yong)提取(qu)(qu)液(ye)定(ding)(ding)容 5mL，取(qu)(qu)上清待測。 2. 細(xi)(xi)(xi)胞：取(qu)(qu)約 500 萬個(ge)細(xi)(xi)(xi)胞，加入(ru) 2mL 的細(xi)(xi)(xi)胞提取(qu)(qu)液(ye)，于(yu)高壓(ya)消毒(du)器中 15 磅(bang)保持 30min，自然降壓(ya)后(hou)待測。二、測定(ding)(ding)操(cao)作：對(dui)照管 測定(ding)(ding)管樣(yang)本(ben)（mL） 0.2 試(shi)劑一（mL） 0.2 0.2 混勻，室(shi)溫靜(jing)(jing)置(zhi) 20min 試(shi)劑二（mL） 0.2 0.2 H2O（mL） 0.6 0.4 混勻，60℃，20min，取(qu)(qu)出后(hou)室(shi)溫靜(jing)(jing)置(zhi) 15 min，測定(ding)(ding) A560。(A560=A 測定(ding)(ding)-A 對(dui)照) 羥脯(fu)(fu)氨酸含量計(ji)算：標準曲線(xian)：y=64.875x+ 0.0251，R 2=0.9991 （1）按組(zu)織計(ji)算 HYP 含量（mg/g） =（A560-0.0251）÷64.875×V 反(fan)(fan)總÷(V 樣(yang)÷V 樣(yang)總×W) =0.385×（A560-0.0251）÷W （3）按細(xi)(xi)(xi)胞計(ji)算： HYP 含量（mg/10 4cell)= （A560-0.0251）÷64.875×V 反(fan)(fan)總÷V 樣(yang)×V 樣(yang)總÷細(xi)(xi)(xi)胞數量（萬個(ge)） =0.154×（A560-0.0251）÷細(xi)(xi)(xi)胞數量（萬個(ge)） V 反(fan)(fan)總：反(fan)(fan)應(ying)體系總體積(ji)(ji)，1mL； V 樣(yang)：反(fan)(fan)應(ying)中樣(yang)本(ben)體積(ji)(ji)，0.2mL；V 樣(yang)總：加入(ru)提取(qu)(qu)液(ye)體積(ji)(ji)，mL； W：樣(yang)本(ben)質量，g。

羥脯氨酸(HYP)含量檢測試劑盒

組(zu)織(zhi)提取(qu)液：6mol/L 鹽酸，自備。濃鹽酸：H2O（V/V）= 1:1，室溫保存；細胞(bao)提取(qu)液：液體(ti) 100mL×1 瓶(ping)(ping)，4 ℃保存；試(shi)(shi)劑一：液體(ti) 10mL×1 瓶(ping)(ping)，4 ℃避光保存；試(shi)(shi)劑二：液體(ti) 10mL×1 瓶(ping)(ping)，4 ℃避光保存。

 相關文獻：

《Enhancement of the chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells and cartilage repair by ghrelin》 作(zuo)者:Litong Fan  Jiaqing Chen  Yanmeng Tao  Boon Chin Heng  Jiakuo Yu  Zheng Yang  Zigang Ge 期刊:Wiley Online Library 影響因子: PMID:30644571