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氨基酸(AA)含量檢測試劑盒

動(dong)物(wu)肝臟、腎臟是(shi)氨(an)基酸(suan)(suan)代(dai)謝的主(zhu)要器官，故尿中(zhong)氨(an)基酸(suan)(suan)的變(bian)化(hua)能(neng)反應肝、腎的生理狀態。另外，氨(an)基酸(suan)(suan)還能(neng)反應灼傷、傷寒等方面情況。植物(wu)體(ti)內氨(an)基酸(suan)(suan)含(han)量(liang)對(dui)(dui)研(yan)究植物(wu)在不同條件(jian)下及不同生長發(fa)育時期氮(dan)代(dai)謝變(bian)化(hua)、植物(wu)對(dui)(dui)氮(dan)素的吸收、運輸、同化(hua)及營養狀況等有重要意義。氨(an)基酸(suan)(suan)的 α-氨(an)基可與(yu)水合茚三酮反應，產生藍紫(zi)色化(hua)合物(wu)，在 570 nm 有特征吸收峰(feng)；通過(guo)測定 570 nm 吸光(guang)度，來(lai)計算氨(an)基酸(suan)(suan)含(han)量(liang)。

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一、樣(yang)品中氨(an)基酸提(ti)取(qu)(qu)：稱(cheng)取(qu)(qu)約 0.1g 組織(zhi)，加試劑一 1mL，室溫下充分研磨，轉移(yi)到(dao) 1.5 mL EP 管中，蓋緊(jin)后（防止(zhi)水分散失）置(zhi)于沸水浴(yu)提(ti)取(qu)(qu) 15 min；自來水冷卻后，10000rpm，4℃離心(xin) 10min，取(qu)(qu)上清液(ye)，待測。

二、測定(ding)： 1. 分光(guang)光(guang)度計預熱 30 min 以(yi)上，調(diao)節波長到(dao) 570 nm，蒸餾水調(diao)零。 2. 在 EP 管(guan)中加入下列試(shi)(shi)劑(ji)試(shi)(shi)劑(ji)名稱（μL）測定(ding)管(guan) 標(biao)準(zhun)(zhun)管(guan) 空白管(guan)樣本 10 — — 標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin) — 10 — 蒸餾水 — — 10 試(shi)(shi)劑(ji)二 100 100 100 試(shi)(shi)劑(ji)三(san) 100 100 100 試(shi)(shi)劑(ji)四(si) 10 10 10 混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫 15 min，冷卻后反復顛倒(dao) EP 管(guan)數次，將 測定(ding)管(guan) 8000rpm 離心 5min 后取(qu)上清，于 570nm 測定(ding)吸(xi)光(guang)值。顯色后務必在 30min 內測完。

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計算（1）按蛋白濃度計算氨基酸含量（μmol /mg 蛋白）=[C 標準(zhun)品×V 標準(zhun)品×(A 測定(ding)－A 空(kong)(kong)白)÷(A 標準(zhun)－A 空(kong)(kong)白)] ÷（Cpr×V 樣）=10×(A 測定(ding)－A 空(kong)(kong)白)÷(A 標準(zhun)－A 空(kong)(kong)白) ÷Cpr

（2）按(an)樣(yang)(yang)(yang)(yang)本鮮重計算氨基酸含(han)量（μmol /g 鮮重）=[C 標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)×V 標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)×(A 測(ce)定－A 空(kong)白)÷(A 標(biao)準(zhun)(zhun)－A 空(kong)白)]×（V 樣(yang)(yang)(yang)(yang)總 ÷V 樣(yang)(yang)(yang)(yang)）÷W=10×(A 測(ce)定－A 空(kong)白)÷(A 標(biao)準(zhun)(zhun)－A 空(kong)白) ÷W C 標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)：標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)濃度，10 μmol/mL；V 標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)：反應(ying)體系中(zhong)加入(ru)標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)體積，0.01 mL；W：樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)質量，g；V 樣(yang)(yang)(yang)(yang)：反應(ying)體系中(zhong)加入(ru)樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)提取(qu)液體積，0.01 mL；V 樣(yang)(yang)(yang)(yang)總：樣(yang)(yang)(yang)(yang)品(pin)提取(qu)液總體積，1mL； Cpr：上(shang)清液蛋白質濃度，mg/mL。