產品名稱:線粒(li)體分離和酶提取檢測試劑盒(he)
產品型號:BC3270
產品特點:線粒體分離和酶提取檢測試劑盒線粒體是半自主性細胞器,不僅是細胞內氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要場所,為細胞的活動提供能量,而且在許多生命活動中具有重要調控作用。因此,準確和全面分離保持正常活性的線粒體已經成為許多研究的前提。利用專門試劑溫和勻漿組織和細胞,再采用差速離心法從勻漿中分離完整線粒體;利用專門試劑,配合超聲波破碎線粒體,可以得到保持活性的線粒體酶。
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線粒體分離和酶提取檢測試劑盒
1、準確(que)稱取(qu)約(yue)0.1g 組織或(huo)收集約(yue)500萬細胞,加(jia)入1mL試(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)一(yi)和(he)10uL試(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)四,用(yong)(yong)(yong)冰(bing)浴(yu)(yu)勻漿器或(huo)研(yan)缽研(yan)磨(mo)。 2、4 ℃ 600 g 離心 5min。 3、棄(qi)沉(chen)淀(dian),將(jiang)上清液移另一(yi)離心管(guan)中(zhong),4 ℃ 11000 g 離心 10min。 4、上清液即胞漿提取(qu)物,可用(yong)(yong)(yong)于(yu)(yu)研(yan)究線(xian)粒(li)(li)體(ti)(ti)蛋白向胞漿的(de)(de)(de)釋(shi)放。 5、沉(chen)淀(dian)為完整(zheng)(zheng)線(xian)粒(li)(li)體(ti)(ti)。含有完整(zheng)(zheng)的(de)(de)(de)內膜(mo)和(he)外(wai)膜(mo),并具有線(xian)粒(li)(li)體(ti)(ti)的(de)(de)(de)生理功能。可用(yong)(yong)(yong)于(yu)(yu)線(xian)粒(li)(li)體(ti)(ti)的(de)(de)(de)生理功能等方面的(de)(de)(de)研(yan)究。 6、在沉(chen)淀(dian)中(zhong)加(jia)入200uL試(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)二和(he)2uL試(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)四,超(chao)聲(sheng)波破(po)碎(冰(bing)浴(yu)(yu),功率20%或(huo)200W,超(chao)聲(sheng)3秒(miao),間(jian)隔10秒(miao),重復30次(ci)),可用(yong)(yong)(yong)于(yu)(yu)線(xian)粒(li)(li)體(ti)(ti)酶活性測(ce)定。 7、在沉(chen)淀(dian)中(zhong)加(jia)入200uL試(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)三和(he)2uL試(shi)(shi)劑(ji)(ji)(ji)四,超(chao)聲(sheng)波破(po)碎(冰(bing)浴(yu)(yu),功率20%或(huo)200W,超(chao)聲(sheng)3秒(miao),間(jian)隔10秒(miao),重復30次(ci)),可用(yong)(yong)(yong)于(yu)(yu)線(xian)粒(li)(li)體(ti)(ti)蛋白濃度(du)測(ce)定。
線粒體分離和酶提取檢測試劑盒
試劑一:50mL×1 瓶,-20℃保存;試劑二(er):10mL×1 瓶,-20℃保存;試劑三(san):10mL×1 瓶,-20℃保存;試劑四:1mL×1 支,-20℃保存;
1、分離線粒體和(he)(he)提取(qu)線粒體蛋白質(zhi)的所有步驟(zou)均需(xu)在冰上或(huo)(huo) 4℃進行(xing),所用(yong)溶液需(xu)冰浴或(huo)(huo) 4℃預冷。 2、通常在分離線粒體時前后兩次離心速(su)度選取(qu) 600g 和(he)(he) 11,000g,如果希望純度更高(gao),但(dan)對線粒體的得率要求不高(gao),前后兩次離心速(su)度可以采用(yong) 1000g 和(he)(he) 3500g。
3、為(wei)了您的安全和(he)健康,請穿實驗服并戴(dai)一(yi)次性手套操作
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