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膠原酶Ⅰ 細胞培養試劑

膠原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和腎(shen)上腺(xian)組織(zhi)細胞(bao)的分(fen)離

膠原蛋白酶(mei) 來源于(yu)溶組織梭菌

膠原酶Ⅰ可以用 TESCA buffer （50 mM TES，0.36 mM 氯化鈣，pH 7.4，37°C）配制成 1-2 mg/ml。 也可以用含鈣鎂的 PBS、含鈣鎂的 hanks 或不含血清的培養基配制。配完后分裝，避免反復凍融。
1 個膠原消化單位（CDU）：在 pH 7.4，37℃以及鈣離子存在的條件下，以每5小時從膠原中 釋放的多肽相當于茚三酮顯色1微摩爾亮氨酸量為一個活性單位。
1FALGPA 單位：在 pH 7.5、25℃以及鈣離子存在的條件下，一個 FALGPA 水解單位每分鐘 可水解 1.0μmol 呋喃基丙烯酰基-Leu-Gly-Pro-Ala。
為粗品，用于上皮(pi)、肺，脂肪(fang)和(he)(he)腎上腺組(zu)織(zhi)細胞的(de)(de)分離。外觀(guan)為黑(hei)棕色(se)粉(fen)末。分子量68,000 到125,000，適PH為6.3-8.8。膠(jiao)原(yuan)酶(mei)(mei)(mei)能夠(gou)特異性結合(he)-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-序列(lie)中(zhong)(zhong)的(de)(de)中(zhong)(zhong)性氨基酸（X） 和(he)(he)甘氨酸之(zhi)間(jian)的(de)(de)肽鍵。該粗品是(shi)溶組(zu)織(zhi)梭(suo)(suo)菌分泌的(de)(de)混合(he)酶(mei)(mei)(mei)。主要(yao)為膠(jiao)原(yuan)酶(mei)(mei)(mei)、中(zhong)(zhong)性蛋(dan)白酶(mei)(mei)(mei)和(he)(he)梭(suo)(suo)菌蛋(dan)白 酶(mei)(mei)(mei)。其中(zhong)(zhong)梭(suo)(suo)菌蛋(dan)白酶(mei)(mei)(mei)是(shi)被氧化的(de)(de)、不活(huo)潑的(de)(de)酶(mei)(mei)(mei)，組(zu)織(zhi)的(de)(de)分離必須依(yi)靠膠(jiao)原(yuan)酶(mei)(mei)(mei)和(he)(he)中(zhong)(zhong)性蛋(dan)白酶(mei)(mei)(mei)兩者共 同作用。

激活劑：Ca2+，適合濃(nong)度(du)為5 mM。

抑制(zhi)劑(ji)：EGTA、還原性谷胱甘肽、β-巰基乙醇、巰基乙酸鈉、8-羥基喹啉(lin)、2,2'-聯(lian)吡啶等。

底(di)物(wu)(wu)：不同(tong)類型的(de)膠原(yuan)是(shi)其天(tian)然底(di)物(wu)(wu)，而一些合成的(de)多(duo)肽也(ye)可(ke)以作為其底(di)物(wu)(wu)，比(bi)如(ru)： N-CBZ-gly-pro-gly-gly-pro-ala (Km = 0.71 mM)、N-CBZ-gly-pro-leu-gly-pro、N-(3-(2-furyl)acryloyl)- leu-gly-pro-ala(FALGPA)、4-Phenylazo benzyloxycarbonyl-pro-leu-gly-pro-D-arg、N-2,4-Dinitrophenyl- pro-gln-gly-ile-ala-gly-gln-D-arg。除此(ci)之外N-Succinyl-gly-pro-leu-glypro7-amido-4-methylcoumarin是(shi) 類膠原(yuan)酶(mei)(mei)的(de)肽酶(mei)(mei)的(de)底(di)物(wu)(wu)。N-(2,4-Dinitrophenyl)-proleu-gly-leu-trp-ala-D-arg 氨基酸(suan)化合物(wu)(wu)是(shi)脊(ji)椎動物(wu)(wu) 膠原(yuan)酶(mei)(mei)的(de)底(di)物(wu)(wu)。

膠原酶Ⅰ 細胞培養試劑