過氧化氫(H2O2)含量檢測試劑盒 產品名(ming)稱:過氧化氫(H2O2)含量檢測試劑盒 產品英文名:Micro Hydrogen Peroxide(H2O2) Assay Kit 產品貨號:BC3590 產(chan)地(di):北京市通州區(qu)馬駒橋聯東U谷8三樓 產(chan)品(pin)規格:50管(guan)/48樣 產(chan)品商標:solarbio 保存(cun)與運輸:4℃保存或-20℃保(bao)存; 參考價格(ge):190 庫存狀態:現貨(huo) 關(guan)鍵字:過氧化氫試劑盒
簡要介紹(shao): H2O2是(shi)生(sheng)物體(ti)(ti)內(nei)常見的活性(xing)氧(yang)分子(zi)(zi),主要由SOD和XOD等(deng)催(cui)化(hua)(hua)(hua)產(chan)生(sheng),由CAT和POD等(deng)催(cui)化(hua)(hua)(hua)降解(jie)(jie)。H2O2不僅是(shi)重要的活性(xing)氧(yang)之一,也(ye)是(shi)活性(xing)氧(yang)相互轉化(hua)(hua)(hua)的樞紐。一方面,H2O2可以直(zhi)接或間接地(di)氧(yang)化(hua)(hua)(hua)細(xi)胞(bao)內(nei)核(he)酸,蛋白(bai)質等(deng)生(sheng)物大分子(zi)(zi),并使細(xi)胞(bao)膜遭受損害,從而加速細(xi)胞(bao)的衰老和解(jie)(jie)體(ti)(ti);另一方面H2O2也(ye)是(shi)許多(duo)氧(yang)化(hua)(hua)(hua)應(ying)急反應(ying)中的關鍵調節(jie)因子(zi)(zi) 產品詳細描(miao)述 商品貨(huo)號: | 商(shang)品品牌(pai): | 規(gui)格 | 基(ji)本(ben)售價(jia): | 選擇規格 | BC3590-50管/48樣 | Solarbio | 50管/48樣 | 190.00元 | |
產品內容: 試劑(ji)一:丙(bing)tong 100mL×1 瓶(ping),4℃保存;(自(zi)備) 試劑(ji)二(er):粉劑(ji)×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 3mL 濃(nong)鹽酸充分溶(rong)解備用。用不完(wan)的試劑(ji) 4℃保存; 試劑三:液(ye)體 6mL×1 瓶,4℃保存; 試劑四:液體 30mL×1 瓶,4℃保存; 標準品:液體 1mL×1 支,4℃保(bao)存,1mmol/mLH2O2標準液。
產品說明: H2O2是(shi)生(sheng)物體內常見(jian)的(de)(de)(de)活(huo)性(xing)氧(yang)(yang)(yang)分子(zi)(zi),主(zhu)要(yao)由 SOD 和 XOD 等(deng)催化產生(sheng),由 CAT 和 POD 等(deng)催 化降(jiang)解(jie)。H2O2不(bu)僅是(shi)重要(yao)的(de)(de)(de)活(huo)性(xing)氧(yang)(yang)(yang)之一(yi),也是(shi)活(huo)性(xing)氧(yang)(yang)(yang)相互(hu)轉化的(de)(de)(de)樞(shu)紐。一(yi)方(fang)面,H2O2可以直接(jie)或 間(jian)接(jie)地氧(yang)(yang)(yang)化細(xi)(xi)胞(bao)(bao)內核酸(suan),蛋白質(zhi)等(deng)生(sheng)物大分子(zi)(zi),并使細(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜遭受(shou)損害,從(cong)而加速細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)衰老和解(jie)體; 另一(yi)方(fang)面 H2O2也是(shi)許多氧(yang)(yang)(yang)化應急反應中的(de)(de)(de)關鍵(jian)調節因子(zi)(zi)。 H2O2與硫酸(suan)鈦(tai)生(sheng)成黃色的(de)(de)(de)過氧(yang)(yang)(yang)化鈦(tai)復合物,在 415nm 有特征吸收。
需自備的儀器和用品: 可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器(qi)、微量玻璃比(bi)色皿/96 孔(kong)板、丙tong、濃鹽(yan) 酸(suan)、研缽和冰。
操作步驟: 一(yi)、H2O2提(ti)取: 1、細(xi)菌或(huo)(huo)(huo)細(xi)胞(bao)(bao)樣(yang)品的制備(bei): 收(shou)集細(xi)菌或(huo)(huo)(huo)細(xi)胞(bao)(bao)到(dao)離(li)(li)心(xin)(xin)管內,離(li)(li)心(xin)(xin)后(hou)棄上清(qing);按照(zhao)每 500 萬細(xi)菌或(huo)(huo)(huo)細(xi)胞(bao)(bao)加入 1mL 試劑一,超聲(sheng) 波(bo)破碎細(xi)菌或(huo)(huo)(huo)細(xi)胞(bao)(bao)(功率 20%,超聲(sheng) 3s,間隔 10s,重(zhong)復 30 次);8000g4℃離(li)(li)心(xin)(xin) 10min,取(qu)上清(qing), 置冰上待測。 2. 組織樣品(pin)的制備: 稱取(qu)約 0.1g 組織,加(jia)入 1mL 試劑一進行冰浴勻(yun)漿(jiang);8000g4℃離心 10min,取(qu)上(shang)清,置冰上(shang)待 測(ce)。 3、血清(qing)(漿)樣(yang)品:按照(zhao)每(mei) 100μL 血清(qing)(漿)加(jia)入 0.9mL 試劑一的(de)比例充分混(hun)勻;8000g4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 注意事(shi)項: 1、由于試(shi)劑一易揮(hui)發,試(shi)劑一必須先預冷再加(jia),研磨時必須在(zai)冰(bing)上研磨。 2、本試劑盒中試劑的(de)揮發性(xing)較高,請帶一次(ci)性(xing)手(shou)套和口罩。
二(er)、測定步驟: 1、分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)或酶標儀預熱 30min 以上,調(diao)節(jie)波(bo)長 415nm,蒸餾(liu)水(shui)調(diao)零。 2、將試劑二(er)、三和四 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種(zhong))水浴 10min 以上。 3、如果(guo)用 96 孔板將則(ze)(ze)用丙tong將 1mmol/mL 標準液稀(xi)釋為 2μmol/mL 的標準溶液,用微(wei)量玻璃比色 則(ze)(ze)用丙tong將 1mmol/mL 標準液稀(xi)釋為 1μmol/mL 的標準溶液。 4、在 EP 管中按順序加入下列試劑 試劑名稱(cheng)(μL)
試劑名稱(μL) | 測定管(guan) | 標準管 | 對照管 | 樣(yang)本 | 250 | | | 標準溶液 | | 250 | | 試劑一 | | | 250 | 試劑二 | 25 | 25 | 25 | 試劑三(san) | 50 | 50 | 50 | 4000g,常溫離(li)心(xin) 10min,棄上清,留沉淀 | 試劑(ji)四 | 250 | 250 | 250 |
加入試劑四溶解沉淀(dian)后(可先(xian)用丙tong清洗(xi)(xi) 3-5 次來洗(xi)(xi)去植物色素),室溫靜(jing)置 5min,取 200μL 轉移微量(liang)玻璃比色皿或 96 孔板(ban)中測定(ding) 415nm 處吸(xi)光值。對照管只要做(zuo)一次即(ji)可。計(ji)算?A 測(ce)定(ding)=A 測(ce)定(ding)管-A 對照(zhao)管,?A 標準(zhun)=A 標準(zhun)管(guan)-A 對照管(guan)。
三、H2O2含量(liang)計算: 1、按照細(xi)菌、細(xi)胞數量計算: H2O2含量(μmol/104cell)=?A 測定÷(?A 標(biao)準(zhun)÷C 標(biao)液(ye))×V 樣本÷(500×V 樣本÷V 提取) =0.004×?A 測定÷?A 標準(zhun)。 2、按(an)組織鮮重計(ji)算: H2O2含(han)量(liang)(μmol/g 鮮重)=?A 測定÷(?A 標(biao)準÷C 標(biao)液)×V 樣(yang)本÷(V 樣(yang)本÷V 提(ti)取×W) =2×?A 測定÷?A 標準(zhun)÷W。 3、按照蛋白(bai)濃度計算(suan): H2O2含量(liang)(μmol/mgprot)=?A 測定÷(?A 標準÷C 標液)×V 樣本÷(Cpr×V 樣本) =2×?A 測定÷?A 標準÷Cpr。 4、按血(xue)清(漿)體積計算(suan): H2O2含量(μmol/mL)=?A 測定(ding)÷(?A 標準÷C 標液)×10 =20×?A 測定÷?A 標(biao)準。 500:細(xi)胞或細(xi)菌(jun)總數,萬個(ge);C 標(biao)液:H2O2標(biao)準溶液濃度,2μmol/mL;V 樣本(ben):加(jia)入的樣本(ben) 體(ti)積(ji),0.25mL;W:組織鮮重(zhong),g;V 提取:提取過程中所用體(ti)積(ji),1mL;Cpr:樣品蛋白濃度,mg/mL; 10:血(xue)清(qing)稀(xi)釋倍數,[0.1mL 血(xue)清(qing)(漿)+0.9mL 試劑一]÷0.1mL 血(xue)清(qing)(漿)=10。
注意:如果用微量玻(bo)璃比色皿(光徑 d=1cm)將 1mmol/mL 標(biao)準液稀釋(shi)為 1μmol/mL 的(de)標(biao)準溶液。 計算(suan)公式亦(yi)作改變。
相關文獻: 《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID: 《The Combination of piR-823 and Eukaryotic Initiation Factor 3 B (EIF3B) Activates Hepatic Stellate Cells via Upregulating TGF-β1 in Liver Fibrogenesis》 作者:Xuechan Tang,Xiaoli Xie,Xin Wang, Yan Wang,Xiaoyu Jiang, and Huiqing Jiang 期刊:International Medical Journal of Experimental 影響因子:1.42 PMID:30556540 《Physiological and transcriptomic analysis revealed the involvement of crucial factors in heat stress response of Rhododendron hainanense》 作者:Ying Zhao,Wengang Yu,Xiangyu Hu,Youhai Shi,Yu Liu,Yunfang Zhong,Peng Wang,Shuya Deng,Jun Niu,Xudong Yu 期刊:Gene 影響因子:2.638 PMID:29604462 《Heterologous Expression of Salvia miltiorrhiza MicroRNA408 Enhances Tolerance to Salt Stress in Nicotiana benthamiana》 作者: Xiaorong Guo, Junfeng Niu * and Xiaoyan Cao 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30544912 《Decreasing fructose 1,6-bisphosphate aldolase activity reduces plant growth and tolerance to chilling stress in tomato seedlings》 作者:Bingbing Cai, Qiang Li, Fengjiao Liu, Huangai Bi and Xizhen Ai 期刊:Physiologia Plantarum 影響因子:3 PMID:29230823 |