Caspase-3活性測定試劑盒 Caspase-3是凋(diao)亡(wang)(wang)過程中(zhong)主要的終末剪(jian)切酶,因而(er)也是研究多的caspase,它激活pro-caspase-2,6,7,9等,特異水(shui)解多種凋(diao)亡(wang)(wang)關鍵蛋白(bai)如(ru)PARP,介導(dao)細胞核(he)染色(se)(se)(se)質固縮、凋(diao)亡(wang)(wang)小(xiao)體生(sheng)成、核(he)DNA斷裂。試(shi)劑(ji)盒測定原(yuan)理基于Caspase-3特異水(shui)解多肽底(di)物(wu)acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide (Ac-DEVD-pNA),釋放(fang)硝基苯胺pNA。游離硝基苯胺pNA呈黃色(se)(se)(se)在405 nm具有大吸收峰,用普通(tong)可見光分光光度比色(se)(se)(se)方法測定。根據pNA標準管吸光度OD值和標準曲(qu)線(xian),計算來自(zi)底(di)物(wu)肽釋放(fang)的pNA濃(nong)度,得到Caspase-3水(shui)解活性。反應(ying)體系100微升(sheng),試(shi)劑(ji)盒提供的試(shi)劑(ji),除標準曲(qu)線(xian)外可進(jin)行50或100次樣品測定。
適用:測(ce)定哺乳動物組(zu)織(zhi)、細胞caspase-3活性。
組成與儲(chu)存: 1. 裂解緩沖液: 20 ml ,4 ºC 2. 反(fan)應緩沖液: 10 ml ,4 ºC 3. 2 mM Ac-DEVD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光 4. 10 mM pNA標準品: 0.5 ml,-20 ºC避光 以上標出的量為(wei)100次檢(jian)(jian)測(ce),50次檢(jian)(jian)測(ce)的試劑量減半。試劑常溫運輸。到達后按要求儲存,1年內穩定。
所(suo)需儀器: 酶標(biao)儀與96孔酶標(biao)板(ban);或可見光(guang)分光(guang)光(guang)度計(ji)配100μl容積的石(shi)英(ying)比色杯。 工(gong)作(zuo)波(bo)長:大吸收波(bo)長405 nm,如不(bu)具備也可在400~450 nm范圍內測定。 Caspase-3活性測定試劑盒 |