乙醛脫氫酶(ALDH)活性檢測試劑盒 產品名稱:乙醛脫氫酶(ALDH)活性檢測試劑盒產品英文名: Acetaldehyde Dehydrogenase (ALDH)Assay Kit產品貨號:BC0750 產地:北京市通州(zhou)區馬駒橋聯東U谷8三樓產品規格:50管(guan)/48樣 產品商標:solarbio 保存與運輸:4℃保存或-20℃保存(cun); 參考價格:760 庫存(cun)狀態:現(xian)貨 關(guan)鍵(jian)字:乙醛脫氫酶(mei)試劑盒|活性檢(jian)測試劑盒| ALDH活性檢測|試劑盒
簡要介紹: 乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)脫氫(qing)(qing)酶(mei)(mei) (EC 1.2.1.10)是(shi)(shi)醛(quan)脫氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)的(de)(de)一(yi)種(zhong),廣泛存在(zai)于(yu)各(ge)種(zhong)動(dong)物(wu)(wu)(wu)(wu)、植物(wu)(wu)(wu)(wu)和微(wei)生(sheng)物(wu)(wu)(wu)(wu)體(ti)內。主要作(zuo)用是(shi)(shi)將乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)氧化(hua)(hua)成乙(yi)(yi)(yi)酸,在(zai)酒(jiu)精代(dai)謝中起主要作(zuo)用。在(zai)人類(lei)和許多動(dong)物(wu)(wu)(wu)(wu)體(ti)內,線粒體(ti)乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)脫氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)能把(ba)對生(sheng)物(wu)(wu)(wu)(wu)體(ti)有(you)害的(de)(de)醇(chun)類(lei)轉(zhuan)化(hua)(hua),所(suo)以在(zai)細胞解(jie)毒研(yan)究(jiu)中乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)脫氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)受(shou)到(dao)高度關(guan)注(zhu);同(tong)時,乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)脫氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)在(zai)分(fen)子生(sheng)物(wu)(wu)(wu)(wu)學以及相關(guan)疾(ji)病的(de)(de)檢測方面(mian)有(you)較廣泛的(de)(de)研(yan)究(jiu)應用。在(zai)輔酶(mei)(mei)Ⅰ存在(zai)的(de)(de)條件下,乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)脫氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)催化(hua)(hua)乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)和NAD+轉(zhuan)化(hua)(hua)為乙(yi)(yi)(yi)酸和NADH,在(zai)340nm 處的(de)(de)吸(xi)(xi)光值會增(zeng)加,測定340nm 處的(de)(de)吸(xi)(xi)光值變化(hua)(hua),可計算得(de)到(dao)乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)脫氫(qing)(qing)酶(mei)(mei)的(de)(de)活(huo)性(xing)。
產品(pin)詳細描述 商(shang)品貨(huo)號: | 商品(pin)品(pin)牌: | 規格 | 基本售(shou)價: | 選擇規格 | BC0750-50管/48樣 | Solarbio | 50管(guan)/48樣 | 760.00元 | |
產品內(nei)容: 提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存。 試(shi)劑一:液體15mL×1 瓶(ping),4℃保存。 試劑二(er):液(ye)體5mL×1 瓶(ping),4℃避光保存(cun)。 試劑三(san):液體3mL×1 瓶,4℃避光保(bao)存。 試劑四:液體2mL×1 支,4℃保(bao)存。 試劑五:液體2mL×1 支,4℃保存。
產品說明: 乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)(quan)脫(tuo)(tuo)(tuo)(tuo)氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛(quan)(quan)脫(tuo)(tuo)(tuo)(tuo)氫酶的(de)(de)一(yi)種,廣泛存(cun)在(zai)(zai)于各種動物、植物和微生(sheng)物體(ti)(ti)內(nei)。主要(yao) 作(zuo)用(yong)是將乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)(quan)氧化(hua)(hua)成(cheng)乙(yi)(yi)(yi)酸,在(zai)(zai)酒精代謝中起(qi)主要(yao)作(zuo)用(yong)。在(zai)(zai)人類和許多動物體(ti)(ti)內(nei),線粒體(ti)(ti)乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)(quan)脫(tuo)(tuo)(tuo)(tuo)氫酶 能把對生(sheng)物體(ti)(ti)有害的(de)(de)醇類轉(zhuan)化(hua)(hua),所以在(zai)(zai)細(xi)胞解(jie)毒(du)研(yan)究(jiu)中乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)(quan)脫(tuo)(tuo)(tuo)(tuo)氫酶受到(dao)高度關(guan)注(zhu);同時,乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)(quan)脫(tuo)(tuo)(tuo)(tuo)氫 酶在(zai)(zai)分(fen)子生(sheng)物學(xue)以及(ji)相關(guan)疾(ji)病的(de)(de)檢測方面(mian)有較廣泛的(de)(de)研(yan)究(jiu)應用(yong)。 在(zai)(zai)輔(fu)酶Ⅰ存(cun)在(zai)(zai)的(de)(de)條件下,乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)(quan)脫(tuo)(tuo)(tuo)(tuo)氫酶催(cui)化(hua)(hua)乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)(quan)和NAD+轉(zhuan)化(hua)(hua)為(wei)乙(yi)(yi)(yi)酸和NADH,在(zai)(zai)340nm 處的(de)(de)吸 光(guang)值會增加,測定(ding)340nm 處的(de)(de)吸光(guang)值變(bian)化(hua)(hua),可計算得到(dao)乙(yi)(yi)(yi)醛(quan)(quan)脫(tuo)(tuo)(tuo)(tuo)氫酶的(de)(de)活性。 自備實驗(yan)用(yong)品及儀器(qi): 天平、離心機(ji)、恒溫水浴鍋(guo)、紫外(wai)分光光度、1mL 石英比色皿、蒸餾水。
操(cao)作步驟(zou): ALDH 提取:
- 組織:
按照組織質(zhi)量(g):提取液體積(mL)為 1:5-10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入(ru) 1mL 提取液),進(jin)行冰浴勻漿。12000rpm, 4℃離心 20 分(fen)鐘(zhong)。 - 細胞(bao):
按照(zhao)細(xi)胞(bao)數量(10 4個):提取(qu)(qu)液體積(mL)為 500-1000:1 的比例(建議 500 萬細(xi)胞(bao)加入 1mL 提取(qu)(qu)液),冰浴超(chao)聲波破碎細(xi)菌或細(xi)胞(bao)(功率 30%或 300w,超(chao)聲 3 秒(miao),間隔 7 秒(miao)。總時間 3min);10000rpm, 4℃離心 10 分(fen)鐘(zhong),取(qu)(qu)上(shang)(shang)清,置冰上(shang)(shang)待(dai)測(ce)。
測定操作 | 對照管(guan) | 測定管 | 樣本(mL) | | 0.2 | 試(shi)劑一(mL) | 0.3 | 0.3 | 試劑二(mL) | 0.1 | 0.1 | 試劑(ji)三(mL) | 0.05 | 0.05 | 試劑四(mL) | 0.03 | 0.03 | 試劑五(mL) | 0.02 | 0.02 | H2O(mL) | 0.5 | 0.3 |
充分(fen)混(hun)勻,1mL 石英(ying)比色皿,對照(zhao)管調零,于340nm 處(chu)(chu)測(ce)定吸光值(zhi)A1,迅速置于37℃水浴1min, 于340nm 處(chu)(chu)測(ce)定吸光值(zhi)A2,△A= A1-A2。 ALDH 酶活計算 - 按蛋白濃度計算
酶活定義:每毫(hao)克蛋白每分鐘催化還原1μmol NAD+的酶量為(wei) 1U。 ALDH 酶(mei)活(huo)(U/mg prot)=△A/(e× d) ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T=0.804×△A÷Cpr - 按(an)樣本質量(liang)計算
酶活定義:每克蛋白每分鐘催化(hua)還(huan)原1μmol NAD+的酶量(liang)為 1U。 ALDH 酶(mei)活(U/g)=△A/(e× d) ×V反總(zong)÷(V樣×W÷V樣總(zong))÷T=0.804×△A÷W - 按照(zhao)細胞數量計算(suan)
酶活定義:每(mei)10 4個細胞每(mei)分鐘催化還原1μmol NAD+的酶量為 1U。 ALDH 酶活(U/10 4 cell)=△A/(e× d) ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量(萬個))÷T=0.804×△A÷ 細胞數量(萬個) e :NADH 微摩爾消光系數,6.22×10-3 L/μmol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應體系總 體積,1mL;V 樣:反應體系中樣本體積,0.2mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量, g;T:反應時間:1min。
相關文獻: 《Untangling the response of bone tumor cells and bone forming cells to matrix stiffness and adhesion ligand density by means of hydrogels》 作者:Tongmeng Jiang,Jinmin Zhao,Shan Yud,Zhengwei Mao,Changyou Gao,Ye Zhu,Chuanbin Mao,Li Zheng 期刊:Biomaterials 影響因子:10.273 PMID:30343256 《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者:Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin 期刊:Biotechnology for Biofuels 影(ying)響因子(zi):5.452 PMID: |