甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒 微量 產品名稱(cheng): 甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒 微量產品英文(wen)名: Micro Glycerin Trilaurate(TG)Content Assay Kit產品(pin)貨號(hao):BC0625 產地:北京(jing)市(shi)通州區馬駒橋(qiao)聯東U谷8三(san)樓產品規(gui)格(ge):100管/96樣 產(chan)品(pin)商標(biao):solarbio 保存(cun)(cun)與運輸:4℃保存(cun)(cun)或-20℃保存(cun)(cun); 參(can)考價格:980 庫存狀態:現(xian)貨 關(guan)鍵字: : 甘油三酯檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)|TG檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)| 甘油三酯|試(shi)劑(ji)盒(he)
簡要介紹: TG是長鏈脂肪酸和甘油形成(cheng)的脂肪分(fen)(fen)子,不(bu)僅是細胞膜的主要成(cheng)分(fen)(fen),也是重要呼(hu)吸底物(wu)。 用異丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成(cheng)(cheng)甘油及脂肪酸,過dian酸氧化甘油生成(cheng)(cheng)甲醛,在(zai)氯離子(zi)存在(zai)下甲醛與乙酰丙tong縮合生成(cheng)(cheng)黃色(se)物質,在(zai)420 nm有(you)特征吸收(shou)峰,其顏色(se)的深(shen)淺(qian)與TG含量成(cheng)(cheng)正比。
產品(pin)詳細描述 產品內容: 試(shi)劑一:自(zi)備(bei),取玻璃空(kong)瓶(ping),加入(ru)45mL正geng烷,80mL異(yi)丙醇,蓋緊后混勻,4℃保存。 試(shi)劑二:液體3mL×1瓶,4℃保存。 試劑三:液體10mL×1瓶(ping),4℃保(bao)存。 試劑四:液體(ti)3mL×1瓶,4℃避(bi)光保存。 試劑(ji)五(wu):液體10mL×1瓶(ping),4℃避光保存。 試劑六:液(ye)體10mL×1瓶(ping),4℃避光保存。 標(biao)準(zhun)品:液體5mL×1瓶(ping),1mg/mL甘油三酯標(biao)準(zhun)溶(rong)液,4℃保存。
產品說明: TG是長鏈脂(zhi)肪(fang)酸和甘油形成的脂(zhi)肪(fang)分子,不僅是細胞膜的主(zhu)要成分,也是重要呼吸底物。 測定原理: 用異丙醇抽(chou)提取TG,KOH皂化TG后(hou)水解生成(cheng)甘(gan)油及(ji)脂肪酸(suan),過dian酸(suan)氧化甘(gan)油生成(cheng)甲(jia)醛,在氯(lv)離子存在下甲(jia)醛與乙酰丙tong縮合生成(cheng)黃色物質(zhi),在420 nm有特征(zheng)吸收(shou)峰,其顏色的深淺與TG含量成正比。
自備(bei)儀器(qi)和用品: 可見分光光度計(ji)/酶標儀(yi)、微量(liang)比色皿/96 孔板、水浴鍋、可調式(shi)移液槍、雙蒸水、125mL玻璃空(kong)瓶。
操(cao)作步(bu)驟: - TG的提取:
- 組(zu)織(zhi):按照組(zu)織(zhi)質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比(bi)例(建議(yi)稱(cheng)取約0.1g組織(zhi),加入(ru)1mL試(shi)劑一(yi))進行冰(bing)浴勻漿,8000g,4℃離心(xin)10min,取(qu)上清待測。
- 細(xi)胞、細(xi)菌:先(xian)收集400-500萬細胞或細菌(jun)到離心管內,棄(qi)上清,加1mL試劑一,超(chao)聲波破碎1min(強度20%,超(chao)聲2s,停(ting)1s),8000g, 4℃離心10min,取上清待(dai)測。
- 血清(漿)等液體樣品:直接(jie)測定(ding)。
- 測(ce)定操作:
- 分光光度計預(yu)熱(re)30min,調節波(bo)長到420 nm,蒸餾水調零。
- 水浴鍋預熱(re)到65℃。
| 空白管(guan) | 標準(zhun)管 | 測定(ding)管 | 雙蒸水(μL) | 40 | | | 標準(zhun)液(μL) | | 40 | | TG待測液(μL) | | | 40 | 試(shi)劑一(μL) | 125 | 125 | 125 | 試劑(ji)二(er)(μL) | 25 | 25 | 25 |
加(jia)試劑一后充分混勻,再加(jia)試劑二,劇烈振蕩30s,靜置,待分層(ceng)后取上層(ceng)溶(rong)液75μL,置于新(xin)的EP管中。 3.甘油三酯含量測定(ding): | 空白(bai)管 | 標準管(guan) | 測定管 | 上層溶液(μL) | 15 | 15 | 15 | 試劑三 (μL) | 50 | 50 | 50 | 試劑四(μL) | 15 | 15 | 15 | 充分混勻,65℃水(shui)浴(yu)3min | 試劑五(μL) | 50 | 50 | 50 | 試劑六(liu)(μL) | 50 | 50 | 50 | 充分混勻,65℃水浴(yu)15min |
取出EP 管(guan),待冷卻(que)后,于420nm 處比色,記為A 空,A 標和A 測。 注意:空(kong)白管(guan)和標準管(guan)只需測定一次。 1. 血清(漿)中甘油三酯含量: TG 含量(mg/dL)=C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)×100 =100×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空) C 標準品:1mg/mL;100:1dL=100 mL。 2. 組織中甘油三酯含量(liang): (1)按樣本蛋白濃度計(ji)算 TG 含量(liang)(mg/mg prot)= C 標準品(pin)×(A 測-A 空)÷(A 標(biao)-A 空)÷Cpr =(A 測-A 空(kong))÷(A 標-A 空(kong))÷ Cpr (2)按樣本(ben)鮮重計算 TG 含量(liang)(mg/g鮮重)=C 標準品×(A 測-A 空)÷(A 標-A 空(kong))÷W =(A 測-A 空)÷(A 標-A 空)÷ W C 標準品:1mg/mL ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本鮮重(zhong),g/mL 3. 細胞、細菌中甘油三酯含量: TG 含(han)量(liang)(mg/104 cell)=C 標準品×(A 測(ce)-A 空)÷(A 標-A 空)÷細菌(jun)或細胞(bao)密度 =(A 測-A 空)÷(A 標-A 空(kong))÷細(xi)菌或細(xi)胞密度 C 標準品:1mg/mL;細菌或(huo)細胞密(mi)度:104 cell/mL 注意(yi)事項: - 試(shi)劑盒中有(you)易(yi)揮發性物質,實驗(yan)過程中需(xu)佩戴(dai)手(shou)套(tao)和口罩,試(shi)劑瓶蓋(gai)打開后應該及(ji)時蓋(gai)緊。
- 加試劑二后需(xu)劇烈(lie)震蕩,使待測液中甘油三酯得(de)到充分提取。
- 低檢(jian)出限為100μ mol/L。
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