產品名(ming)稱: 游離脂肪酸(FFA)含量檢測試劑盒 微量法(fa)產品(pin)英文名: Micro Free Aliphatic Acid Content Assay Kit產品(pin)貨號:BC0595 產地:北(bei)京(jing)市通州區馬駒橋聯東U谷(gu)8三樓產品(pin)規(gui)格(ge):100管/96樣(yang) 產品商標:solarbio 保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考(kao)價格:780 庫存狀(zhuang)態:現貨 關鍵字: : 游離脂肪酸檢測試(shi)劑(ji)盒|FFA檢測試劑盒| 游(you)離脂(zhi)肪酸(suan)|試劑盒(he)
簡要介紹: FFA既是脂肪水解的產物,又(you)是脂肪合成的底物。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內分(fen)泌功能有關(guan)。 FFA與銅離子結合形成脂肪酸銅鹽,并溶于lv仿(fang);利用銅試劑法測定銅離子含量,即可推(tui)算出游離脂肪酸含量。
產品詳細描述(shu) 產品內容: 提(ti)取液:液體100 mL×1瓶,室(shi)溫保存(cun)。 試劑一:自備。實驗前,取一個(ge)玻(bo)璃瓶,按照正geng烷:無(wu)水甲(jia)醇(chun):lv仿(fang)=24:1:25的比例配置(自備),蓋緊后混(hun)勻,室溫保存。 試劑(ji)二:液體6 mL×1瓶,室溫保存(cun)。 試劑(ji)三:粉劑(ji)×2瓶,4℃保(bao)存。臨用前在試劑(ji)瓶中加入(ru)13mL無水乙(yi)醇,充分溶解,4℃可(ke)保存一周。 標(biao)準品:粉(fen)劑×1瓶,10mg棕櫚(lv)酸,室溫保存。臨用前(qian)把試劑轉移(yi)到10 mL玻(bo)璃瓶(ping)中(zhong),加入7.8 mLlv仿(fang)充分溶解(jie),即為5μmol/mL的棕櫚酸標準溶液。
產品說明(ming): FFA既是脂(zhi)肪水解的產物,又是脂(zhi)肪合成的底物。血清中(zhong)FFA的濃(nong)度(du)與脂類代(dai)(dai)謝、糖代(dai)(dai)謝、內分(fen)泌功能有關。 FFA與銅(tong)離子結合(he)形成(cheng)脂(zhi)肪酸銅(tong)鹽,并溶于(yu)lv仿;利用銅試劑法(fa)測定(ding)銅離子含量,即可推算(suan)出游(you)離脂(zhi)肪酸含量。 自(zi)備儀器和用品: 研缽(bo)、冰、臺式離心機、可(ke)調式移液槍、可(ke)見(jian)分光(guang)光(guang)度計/酶標儀、微量石英(ying)比色皿/96孔板、一個25 mL玻璃瓶、一個(ge)15mL玻璃瓶、正geng烷、無水甲醇、lv仿、無水乙醇(chun)和蒸餾水。
操作步驟: 一(yi)、樣(yang)品中FFA提取(qu): 1、血清(qing)中FFA測定:將所取血液,室溫靜置1 h 后,于4 ℃離心機3500 rpm離心15min,取上(shang)層血清置(zhi)于-20℃冰(bing)箱保存,待測。 2、組織中FFA含量(liang)測定:組織用生理鹽水沖(chong)洗干凈(jing)后,用吸(xi)水紙吸(xi)取表面水分(fen),稱取約(yue)0.1g,加入1.0 mL提取液,勻漿后(hou),8000rpm,4℃離心10min,取上清液,待測(ce)。 二、測定(ding): 1. 分光(guang)光(guang)度計預熱(re)30 min以上,調節波長(chang)到550 nm,無水乙醇調零。 2. 試(shi)劑二在37℃水浴中(zhong)預熱(re)30 min以(yi)上。 3. 標(biao)準(zhun)(zhun)品的稀(xi)釋:將標(biao)準(zhun)(zhun)品稀(xi)釋成1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。 4. 按下表在1.5mL離心(xin)管中加入相應試劑 | 對照管 | 測定管 | 空白管 | 標準管 | 蒸餾水(shui)(μL) | 10 | | | | 樣本(μL) | | 10 | | | lv仿(μL) | | | 10 | | 標準品(μL) | | | | 10 | 試劑一(μL) | 100 | 試劑二(μL) | 40 | 充分振(zhen)蕩10min后(hou),3000rpm,離(li)心10min | 上層(ceng)溶液(μL) | 50 | 試劑(ji)三(μL) | 200 | 充(chong)分振蕩2min后(hou),靜置15min,取0.2mL于微量比(bi)色皿(min)/96孔板(ban),在550 nm下測吸(xi)光(guang)值(zhi),分別記為(wei)A對(dui)照管、A測定管、A空白管(guan)、A標(biao)準管。(對(dui)照管和空(kong)白(bai)管各只做一管) |
三、FFA含量計算: 1.標(biao)準曲(qu)線的繪制: 以標(biao)準溶(rong)液的濃度為x軸,以ΔA標準(ΔA=A標(biao)準管-A空白管)為y軸,繪制標準曲線,得到方(fang)程y=kx+b。將(jiang)ΔA(ΔA=A測(ce)定(ding)管-A對照管)帶入(ru)方(fang)程得到x。 2.血(xue)清(qing)中FFA含量計算(suan) FFA(μmol/L)=1000x
- 組織中FFA含量計(ji)算
(1)按(an)樣本蛋白濃度(du)計算 FFA含量(μmol/mg prot)=x÷Cpr (2)按樣(yang)本鮮重計算(suan) FFA(μmol/g鮮重)=x×V樣總÷W V樣總(zong):上清液(ye)總(zong)體積(ji),1 mL;Cpr:樣本(ben)蛋(dan)白質濃度,mg/mL;W:樣品質量,g。 注意事(shi)項: 1.試(shi)劑(ji)三配制應盡量晚(wan)配,可在操作到加入試(shi)劑(ji)二時(shi),再配制試(shi)劑(ji)三。 2.必須保證(zheng)每管的震(zhen)蕩頻率及時間一致(zhi)。 3.盡(jin)量在30min內完(wan)成測量(liang),并且測完(wan)后要密(mi)封好再丟棄。 4.因所用試劑(ji)多(duo)數為有機溶劑(ji),同一(yi)支(zhi)吸(xi)頭多(duo)次吸(xi)取會造(zao)成(cheng)體積不準(zhun)確,建議更換吸(xi)頭。
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