谷胱甘肽S-轉移酶(GST)活性檢測試劑盒 產(chan)品名稱:谷胱甘肽S-轉移酶(GST)活性檢測試劑盒產品英文名:Glutathione S-transferase (GST)Assay Kit產品貨號:BC0350 產(chan)地:北(bei)京市(shi)通(tong)州區馬駒橋聯東U谷8三樓產品規格:50管/48樣 產品商(shang)標(biao):solarbio 保存與(yu)運輸:4℃保存或(huo)-20℃保存; 參考(kao)價(jia)格:260 庫存狀態:現貨(huo) 關鍵字:谷胱甘肽S-轉移(yi)酶| GST活(huo)性檢(jian)測|試劑盒|
簡要(yao)介紹(shao): GST是一種(zhong)具有(you)多種(zhong)生(sheng)理功能的(de)(de)(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)(zhi)家族,主(zhu)(zhu)要(yao)存(cun)在于(yu)細胞質(zhi)(zhi)(zhi)內。GST是體(ti)內解毒酶系統的(de)(de)(de)(de)(de)重要(yao)組成部分,主(zhu)(zhu)要(yao)催化(hua)(hua)(hua)各種(zhong)化(hua)(hua)(hua)學物質(zhi)(zhi)(zhi)及其代謝產物與GSH的(de)(de)(de)(de)(de)巰(qiu)基共價(jia)結合(he)(he),使親電(dian)化(hua)(hua)(hua)合(he)(he)物變為(wei)(wei)親水物質(zhi)(zhi)(zhi),易于(yu)從膽汁或(huo)尿液中排(pai)泄,達到(dao)將體(ti)內各種(zhong)潛(qian)在或(huo)具備毒性的(de)(de)(de)(de)(de)物質(zhi)(zhi)(zhi)降解并排(pai)出(chu)體(ti)外的(de)(de)(de)(de)(de)目(mu)的(de)(de)(de)(de)(de)。因此,GST在保護細胞免受親電(dian)子化(hua)(hua)(hua)合(he)(he)物的(de)(de)(de)(de)(de)損傷中發揮著重要(yao)的(de)(de)(de)(de)(de)生(sheng)物學功能。此外,因為(wei)(wei)GST具有(you)GSH-Px活(huo)性,亦(yi)稱為(wei)(wei)non-Se GSH-Px,具有(you)修復氧化(hua)(hua)(hua)破壞的(de)(de)(de)(de)(de)大分子如DNA、蛋(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)(zhi)等的(de)(de)(de)(de)(de)功能。注(zhu)意,GST催化(hua)(hua)(hua)的(de)(de)(de)(de)(de)反應減少GSH含量,但是不增加GSSG含量。 產品詳細描述 商(shang)品(pin)貨號: | 商品(pin)品(pin)牌: | 規格 | 基本(ben)售(shou)價(jia): | 選擇規格 | BC0350-50管/48樣 | Solarbio | 50管/48樣(yang) | 260.00元(yuan) | |
產品內容: 試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。 試劑(ji)二:液體 45mL×1 瓶(ping),4℃保存(cun)。 試劑三(san):粉(fen)劑×1 瓶,4℃保存。臨(lin)用(yong)前加 5 mL 蒸餾水溶解。
產(chan)品(pin)說明: 谷胱甘肽 S-轉移酶(mei)(glutathione S-transferase,GST)是(shi)(shi)一(yi)種具(ju)有(you)(you)多種生(sheng)理(li)功能的(de)(de)(de)(de)蛋白(bai)質(zhi)家族, 主(zhu)要(yao)存在(zai)于細胞質(zhi)內(nei)。GST 是(shi)(shi)體內(nei)解毒酶(mei)系統的(de)(de)(de)(de)重(zhong)要(yao)組成(cheng)部分,主(zhu)要(yao)催化(hua)(hua)各種化(hua)(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)及其(qi)代謝(xie)產 物(wu)與 GSH 的(de)(de)(de)(de)巰基共價結(jie)合(he),使親(qin)電(dian)化(hua)(hua)合(he)物(wu)變(bian)為親(qin)水物(wu)質(zhi),易于從膽汁或尿液中排泄(xie),達到將體內(nei) 各種潛在(zai)或具(ju)備(bei)毒性(xing)的(de)(de)(de)(de)物(wu)質(zhi)降解并排出體外(wai)的(de)(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)(de)。因此(ci),GST 在(zai)保護細胞免受親(qin)電(dian)子化(hua)(hua)合(he)物(wu)的(de)(de)(de)(de)損 傷中發揮著重(zhong)要(yao)的(de)(de)(de)(de)生(sheng)物(wu)學(xue)功能。此(ci)外(wai),因為 GST 具(ju)有(you)(you) GSH-Px 活性(xing),亦稱為 non-Se GSH-Px,具(ju)有(you)(you) 修(xiu)復氧化(hua)(hua)破壞(huai)的(de)(de)(de)(de)大分子如 DNA、蛋白(bai)質(zhi)等的(de)(de)(de)(de)功能。注意,GST 催化的反應減少 GSH 含量(liang)(liang),但是不(bu) 增加 GSSG 含量(liang)(liang)。 GST 催化(hua) GSH 與 CDNB 結(jie)合,其結(jie)合產物的光吸(xi)收峰波長(chang)為 340nm;通過測(ce)定 340nm 波長(chang)處 吸(xi)光度上升速率,即可(ke)計算出 GST 活性。 自備儀器(qi)和用(yong)品: 紫(zi)外-可見(jian)分光(guang)光(guang)度(du)計、低溫離心機、水(shui)浴(yu)鍋、可調節移(yi)液(ye)器、1mL 石英(ying)比(bi)色皿和蒸(zheng)餾水(shui)。
操作步驟(zou): 一、粗酶液提(ti)取: 1. 組織:按照(zhao)組織質量(g):試劑一體積(ji)(mL)為 1:5~10 的比例(li)(建(jian)議稱取約 0.1g 組織,加(jia)入 1mL 試劑一)進(jin)行冰浴勻漿。8000g,4℃離(li)心 10min,取上(shang)清置冰上(shang)待測。 2. 細(xi)(xi)菌、真菌:按照(zhao)細(xi)(xi)胞(bao)數量(10 4個):試劑一體(ti)積(mL)為 500~1000:1 的比例(li)(建議(yi) 500 萬 細(xi)(xi)胞(bao)加入(ru) 1mL 試劑一),冰浴超聲(sheng)(sheng)波破碎細(xi)(xi)胞(bao)(功率 300w,超聲(sheng)(sheng) 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min); 然后 8000g,4℃,離心 10min,取上清置于(yu)冰上待測。 3. 血清等液體:直(zhi)接測定。 二、測定: 1. 分光光度(du)計預熱 30 min 以上,調節(jie)波長到 340 nm,用蒸餾水調零(ling)。 2. 試劑二(er)、試劑三放在 25℃(一般物(wu)種)或者 37℃(哺(bu)乳動物(wu))保溫。 3. 空白管(guan):取 1mL 石英比(bi)色皿,加入 100μL 試劑(ji)一,900μL 試劑(ji)二和 100μL 試劑(ji)三,迅速(su)混勻后 于(yu) 340nm 測定 10 s 吸(xi)光(guang)度記 A1,37℃水浴 5min 后,快(kuai)速(su)取出測定吸(xi)光(guang)度記 A2。 4. 測定(ding)(ding)管:取(qu) 1mL 石英比色皿,加入(ru) 100μL 上清(qing)液,900μL 試(shi)劑(ji)二和 100μL 試(shi)劑(ji)三,迅速混(hun)勻后(hou) 于(yu) 340nm 測定(ding)(ding) 10 s 吸光度記 A3,37℃水浴 5min 后(hou),快速取(qu)出測定(ding)(ding)吸光度記 A4。 三(san)、GST 活性計算: (1)按蛋白濃度計算 活(huo)性單(dan)位(wei)定義:在 25℃或者 37℃中,每(mei)毫克蛋白每(mei)分(fen)鐘催化(hua) 1μmol CDNB 與 GSH 結(jie)合為一個 酶活(huo)性單(dan)位(wei)。 GST(U/mg prot)=[(A4-A3)-(A2-A1)]÷ε÷d×10 6×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷T =0.23×[(A4-A3)-(A2-A1)] ÷Cpr (2)按樣本鮮重計算(suan) 活性(xing)單位定(ding)義:在 25℃或(huo)者 37℃中,每(mei)克樣品每(mei)分鐘催化 1μmol CDNB 與 GSH 結(jie)合為一個酶 活性(xing)單位。 GST(U/g 鮮重)=[(A4-A3)-(A2-A1)]÷(ε×d)×10 6×V 反(fan)總÷(V 樣(yang)÷V 樣(yang)總×W)÷T =0.23×[(A4-A3)-(A2-A1)] ÷W (3)按細胞數量計算(suan) 活(huo)性單(dan)位定義:在 25℃或(huo)者 37℃中,每 10 4個細胞每分鐘催化(hua) 1μmol CDNB 與 GSH 結合為(wei)一 個酶(mei)活(huo)單(dan)位。 GST(U/10 4 cell)=[(A4-A3)-(A2-A1)]÷ε÷d×10 6×V 反總÷(細胞數(shu)量(liang)×V 樣(yang)÷V 樣(yang)總)÷T =0.23×[(A4-A3)-(A2-A1)] ÷細胞數(shu)量(liang) (4)按液體體積計(ji)算 活性單位(wei)定義:在 25℃或者 37℃中,每毫(hao)升液(ye)體每分(fen)鐘催(cui)化(hua) 1μmol CDNB 與 GSH 結合為一個 酶(mei)活單位(wei)。 GST(U/mL)=[(A4-A3)-(A2-A1)]÷ε÷d×10 6×V 反(fan)(fan)總(zong)÷V 樣(yang)÷T =0.23×[(A4-A3)-(A2-A1)] ε:產物摩爾消光系(xi)數,9.6×10 3 L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;10 6:1mol=1×10 6μmol;V 反(fan)(fan) 總(zong):反(fan)(fan)應(ying)體(ti)系(xi)總(zong)體(ti)積,1100μL=0.0011 L;Cpr:上清(qing)液(ye)蛋白(bai)質濃度(du)(mg/mL),需要另外測(ce)定,建(jian)議 選用本公司生產的 BCA 蛋白(bai)質濃度(du)測(ce)定試劑盒;V 樣(yang):加(jia)入反(fan)(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中上清(qing)液(ye)體(ti)積,100μL=0.1 mL; T:反(fan)(fan)應(ying)時間(jian),5min;W:樣(yang)品鮮重,g;V 樣(yang)總(zong):試劑一體(ti)積,1 mL。
注(zhu)意事項: 1. 樣品處(chu)理等過程均需要在(zai)冰上進(jin)行(xing),且須在(zai)當日(ri)測定酶活力; 2. 細胞(bao)(bao)中 GST 活性測定(ding)時,細胞(bao)(bao)數目須在 300 萬-500 萬之間(jian),細胞(bao)(bao)中 GST 的提(ti)取時可加試(shi)劑一后 研磨或(huo)超聲波(bo)處理,不(bu)能用細胞(bao)(bao)裂解液處理細胞(bao)(bao); 3. 測定前先用(yong) 1~2 個樣(yang)做預實驗,如 5min 內反應不成線性,須對樣(yang)品(pin)用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)稀釋,計算結果(guo)乘 以稀釋倍數(shu); 4. 若樣(yang)品測定吸光度大于 1,建(jian)議對樣(yang)品用蒸餾水稀釋(shi),計算時結果(guo)乘(cheng)以稀釋(shi)倍數; 5. 測定反映的溫度對測定結果有影響,請控制在 25℃或者 37℃(哺乳動物)。
相關文獻: 《Systemic response of the stony coral Pocillopora damicornis against acute cadmium stress》 作者:Zhi Zhou,Xiaopeng Yua,Jia Tang,Yibo Wu,Lingui Wang,Bo Huang 期刊:Aquatic Toxicology 影響因子:3.794 PMID:29179148 《Transcriptome Sequence Analysis Elaborates a Complex Defensive Mechanism of Grapevine (Vitis vinifera L.) in Response to Salt Stress》 作者:Le Guan , Muhammad Salman Haider , Nadeem Khan , Maazullah Nasim , Songtao Jiu , Muhammad Fiaz , Xudong Zhu , Kekun Zhang and Jinggui Fang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30545146 《2′,4′-Dihydroxy-6′-methoxy-3′,5′-dimethylchalcone, a potent Nrf2/ARE pathway inhibitor, reverses drug resistance by decreasing glutathione synthesis and drug efflux in BEL-7402/5-FU cells》 作者:Xing Wei,Xuejun Mo,Faliang An,Xiang Ji,Yanhua Lu 期刊:Food and Chemical Toxicology 影響因子:3.775 PMID:29626576 《A Damaged Oxidative Phosphorylation Mechanism Is Involved in the Antifungal Activity of Citral against Penicillium digitatum》 作者:Qiuli OuYang, Nengguo Tao* and Miaoling Zhang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.259 PMID:29503638 《Cadmium detoxification induced by salt stress improves cadmium tolerance of multi-stress-tolerant Pichia kudriavzevii》 作者:Chunsheng Li,Xianqing Yang,Ying Xu,Laihao Li,Yueqi Wang 期刊:Environmental Pollution 影響因子:5.714 PMID:30036838 《Effects of Phytase Transgenic Maize on the Physiological and Biochemical Responses and the Gut Microflora Functional Diversity of Ostrinia furnacalis》 作者:Xiao Hui Xu, Yinghui Guo, Hongwei Sun, Fan Li, Shuke Yang, Rui Gao & Xingbo Lu 期刊:Scientific Reports 影響因子:4.011 PMID:29535326 《Chronic toxicity and biochemical response of Apis cerana cerana (Hymenoptera: Apidae) exposed to acetamiprid and propiconazole alone or combined》 作者:Wensu HanYemeng YangJinglin GaoEmail authorDongxiang ZhaoEmail authorChengcai RenShijie WangShan ZhaoYihai Zhong 期刊:Ecotoxicology 影響因子:2.46 PMID:30874992 《Acid stress induces cross-protection for cadmium tolerance of multi-stress-tolerant Pichia kudriavzevii by regulating cadmium transport and antioxidant defense system》 作者:Chunsheng Li,Ying Xu,Laihao Li,Xianqing Yang,Yueqi Wang 期刊:J. Hazard. Mater 影響因子:7.65 PMID:30513442
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