產品名(ming)稱: 海藻糖含量檢測試劑盒產品英文名(ming): Trehalose Content Assay Kit產(chan)品貨(huo)號:BC0330 產(chan)地(di):北京市通州區馬(ma)駒(ju)橋聯東U谷8三樓(lou)產品規格:50管(guan)/48樣 產品(pin)商(shang)標:solarbio 保(bao)存與運輸:4℃保(bao)存或-20℃保(bao)存; 參考價格:420 庫(ku)存狀態:現貨 關鍵字(zi): 海藻糖檢測試劑盒| 海藻糖含量檢測試劑盒| 海藻糖|試劑盒
簡要介紹: 海藻糖存在于(yu)(yu)大量有機體中,包(bao)括細菌(jun)、藻類(lei)、酵(jiao)母、植(zhi)物(wu)、昆蟲和其他無(wu)脊椎(zhui)動物(wu)。由于(yu)(yu)海藻糖具有*的(de)(de)不同于(yu)(yu)其他碳水(shui)化合(he)物(wu)的(de)(de)生物(wu)學特性,能(neng)在干旱(han)、高溫、脫水(shui)、冷凍、高滲透壓及毒性物(wu)質等惡(e)劣環境(jing)下(xia)保護生物(wu)體細胞蛋(dan)白質、脂肪、糖類(lei)、核酸(suan)等組(zu)分不受損害。
產品詳細描述 產(chan)品內容: 提取液(ye):液(ye)體50mL×1瓶,4℃保存; 試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存; 標準(zhun)品(pin):粉劑×1支,含10mg海藻糖。 產(chan)品說明(ming): 海藻糖存在于大量有(you)機(ji)體(ti)中,包括細菌、藻類(lei)、酵母、植物(wu)(wu)、昆蟲和其(qi)他無脊椎動(dong)物(wu)(wu)。由于海藻糖具(ju)有(you)*的(de)不同于其(qi)他碳水(shui)化合物(wu)(wu)的(de)生物(wu)(wu)學特性,能在干旱、高溫、脫水(shui)、冷凍、高滲透壓及毒性物(wu)(wu)質等惡劣環境下保護生物(wu)(wu)體(ti)細胞蛋白質、脂肪、糖類(lei)、核酸等組分不受損(sun)害。 測定(ding)方法采用蒽酮比色法。具有靈敏度(du)高﹑簡便快捷(jie)﹑適用于(yu)微(wei)量樣品的測定(ding)等優點。但是蒽酮比色法也存在一定(ding)缺(que)陷,如果樣(yang)本中含有可(ke)溶性糖,則會影(ying)響(xiang)測(ce)定(ding)。本試劑盒(he)建議用于除(chu)海藻糖外不含其他可(ke)溶性糖樣(yang)本的測(ce)定(ding)。 需自備的儀器和用品: 可(ke)見分光(guang)光(guang)度計、水(shui)浴鍋、可(ke)調式移液(ye)器、1mL玻璃比(bi)色(se)皿(min)﹑研缽、濃硫(liu)酸和(he)蒸餾水(shui)。
操(cao)作步驟: 一、海藻糖提取(qu): - 細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞處理:收集細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞到(dao)離(li)心管內,離(li)心后棄上(shang)清;按照每500萬細(xi)菌(jun)或(huo)細(xi)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次),室溫靜(jing)置45min,振(zhen)蕩3~5次,冷卻后,8000g,常溫離(li)心(xin),取上清。
- 組織的處理:稱取(qu)約0.1g樣本,常溫研碎(sui),加入1mL提取(qu)液,室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,常溫離心,取(qu)上清。
- 血清(qing)(漿(jiang))的處(chu)理:吸取約100μL血清(qing)(漿(jiang)),加入0.9mL提取(qu)液,室溫(wen)靜(jing)置45min,振(zhen)蕩(dang)3~5次,冷卻后,8000g,常溫(wen)離心,取(qu)上清。
- 標(biao)準(zhun)品的處理:標(biao)準(zhun)品用1mL雙蒸水溶(rong)解,溶(rong)液濃度為10mg/mL,稀釋到0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0mg/mL。
二、測(ce)定(ding)操作表: - 分(fen)光光度計預熱(re)30min以上,調節波長620nm,蒸(zheng)餾水(shui)調零。
- 調節水浴鍋95度。
- 工作液的配制:臨(lin)用(yong)前(qian)在每瓶試劑一中加入16mL蒸餾水后,緩慢加(jia)入64mL濃硫酸,不(bu)斷攪(jiao)拌,充分溶解,待用。用不(bu)完的試劑(ji)4℃保(bao)存一周(zhou)。
- 標準曲線的(de)建(jian)立:取0.25mL標準液和1mL工(gong)作(zuo)液EP管中,95度水浴10min(蓋緊,防止水分(fen)散(san)失),自然(ran)冷卻(que)室(shi)溫,取1mL比色皿中,在620nm處測吸(xi)光值A。根據標準樣本的濃度(y)和吸(xi)光度(x)建立標準曲線。
- 樣本測定:取0.25mL樣本和1mL工作液EP管中,95度水浴(yu)10min(蓋緊(jin),防止水分散失),自然(ran)冷卻室溫,取(qu)1mL比色皿中,在620nm處測吸光值(zhi)A。
注意(yi):若吸光值大于1,請(qing)將樣(yang)本用提取液稀(xi)釋后再測定(ding),計算公式中乘以(yi)相應的稀(xi)釋倍數。 三(san)、海藻糖(tang)含量計算: - 根據標準曲線(xian)計算樣本中海藻糖的含量y(mg/mL)。
- 按樣本鮮重計(ji)算:
海藻糖含量(mg/g 鮮重)= V1×y÷(W×V1÷V2)=y ÷W。 - 按(an)樣(yang)本(ben)蛋白(bai)濃度計算(suan):
海藻糖含(han)量(mg/mg prot)=V1×y÷(V1×Cpr)=y÷Cpr。 - 按細菌或細胞數量計算:
海藻糖(tang)含量(μg/104 cell)=(1000 × V1 × y)÷(500 × V1÷V2)=2× y - 按血(xue)清(漿(jiang))體積含量(liang)計算
海(hai)藻糖含量(mg/mL)=(V1×y)÷(V3×V1÷V2)=10×y 1000:1mg/mL=1000μg/mL;V1:加入(ru)反應體(ti)系中樣本體(ti)積,0.25 mL;V2:提取液總體(ti)積,1mL;V3:加入血清(qing)(漿)體積(ji),0.1mL;Cpr:樣本(ben)蛋白質(zhi)濃(nong)度,mg/mL;W:樣本(ben)質(zhi)量,g;500:細(xi)菌(jun)或細(xi)胞總(zong)數,500 萬(wan)。
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