脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒 產品名稱:脯氨酸(PRO)含量檢測試劑盒產品(pin)英(ying)文名: Proline (PRO) Content Assay Kit產品貨號:BC0290 產地:北京市通州區馬駒橋聯東U谷8三(san)樓產(chan)品規格:50管/48樣 產品商(shang)標:solarbio 保(bao)存(cun)與(yu)運輸(shu):4℃保(bao)存(cun)或-20℃保(bao)存(cun); 參考價格:720 庫存狀態:現貨 關鍵字: : 脯氨酸檢測試劑盒(he)|PRO檢測試劑盒|脯氨酸|試劑(ji)盒
簡要介(jie)紹: Pro 廣泛存在于動物(wu)(wu)、植物(wu)(wu)、微(wei)生物(wu)(wu)和培養細(xi)胞中,逆境條件下,植物(wu)(wu)體(ti)內(nei)Pro 含量顯著增加。Pro 增加量在一定程度上(shang)反映了抗逆性,抗旱性強的品種往(wang)往(wang)積累較多的脯氨酸。因此,脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標之一。 用磺基水楊酸(suan)(SA)提取Pro,加熱處理(li)后,Pro 與酸(suan)性茚三酮溶液反應生(sheng)成紅(hong)色;加甲苯(ben)萃(cui)取后,在(zai)520nm 測(ce)定吸光度。
產(chan)品詳細(xi)描述 產品內容(rong): 提取液(ye):液(ye)體(ti)50mL×1瓶,4℃保存。 試劑一(yi):冰(bing)乙酸4℃保存(cun)。(自備(bei)) 試(shi)劑二:液體45 mL×1瓶, 4℃保存。 試劑(ji)三:甲苯4℃保存。(自備) 標準品:脯氨酸 10mg,4℃保存(cun)。
產品說明: 脯氨酸(Pro)廣泛(fan)存在于(yu)動(dong)物(wu)(wu)、植(zhi)物(wu)(wu)、微生物(wu)(wu)和培(pei)養細胞(bao)中,逆境條(tiao)件下(xia),植(zhi)物(wu)(wu)體內Pro含(han)量顯(xian)著增(zeng)加。Pro增加(jia)量在一定程(cheng)度上(shang)反映了抗逆性,抗旱性強的品種(zhong)(zhong)往(wang)(wang)往(wang)(wang)積累較(jiao)多的脯(fu)氨(an)酸。因此,脯(fu)氨(an)酸增加(jia)量可以作為抗逆育種(zhong)(zhong)的生理指標之(zhi)一。 用(yong)磺基水楊酸(SA)提取Pro,加熱處理后(hou),Pro與酸性茚三酮溶液(ye)反應生成紅色;加甲(jia)苯(ben)萃取(qu)后,在520nm測定吸光度(du)。 實驗需自備的儀器(qi)和用品: 可(ke)見分光光度計、水(shui)浴鍋、臺式離心機、可(ke)調式移液(ye)器、1 mL玻璃比色皿、冰乙(yi)酸、甲苯、研缽、冰和蒸餾(liu)水。
操(cao)作步驟(zou): 一(yi)、樣品測定的準備(bei) 1、細(xi)胞、細(xi)菌(jun)或組織樣品的制(zhi)備 : 細(xi)(xi)(xi)菌或細(xi)(xi)(xi)胞:先收集細(xi)(xi)(xi)菌或細(xi)(xi)(xi)胞到離心管內,棄(qi)上清;按照每100萬細(xi)菌或(huo)細(xi)胞加入(ru)1mL提取(qu)液,超聲波(bo)破碎(sui)細(xi)菌(jun)或細(xi)胞(功率20%,超聲3秒,間(jian)隔10秒,重復30次),之后(hou)置沸水(shui)浴振(zhen)蕩提取10min;10000g,常(chang)溫離心10min,取上清,冷(leng)卻(que)后(hou)待測。 組織:稱取約0.1g組(zu)織,加入(ru)1mL提(ti)取(qu)液進(jin)行(xing)冰浴(yu)勻漿;之后置(zhi)沸水浴(yu)振蕩提(ti)取(qu)10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。 2、血清(漿)樣品:取100μL血(xue)清(漿)加入(ru)0.9mL提取液,充分混勻,之(zhi)后(hou)置沸水浴振(zhen)蕩(dang)提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。 3、標準品(pin)的處理:稱取(qu)1mg,將(jiang)標準品稀(xi)釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/mL。 1、分光(guang)光(guang)度計(ji)預熱30min以上(shang),調節波長520nm,甲苯調零(ling)。 2、取0.5mL上(shang)清液(或稀釋后的標準(zhun)品(pin))+0.5mL試劑一+0.5mL試(shi)劑二于有(you)蓋試(shi)管中,置沸水(shui)浴中保溫30min(蓋緊,防止水分(fen)散失(shi)),每10min振蕩一次。 3、待冷卻后,在(zai)試管中加(jia)入(ru)1mL試劑三,振(zhen)蕩30s,靜置片刻,使色素轉試劑三中;吸取0.8mL-1mL上層(ceng)溶液于1mL玻璃比(bi)色皿中,于520nm波(bo)長處(chu)比色,記(ji)錄吸光值。 4、根據標準品吸光(guang)值和濃度,建立標準曲線。
三、Pro含量計算: 1、通(tong)過標準曲線(xian)計算樣品脯(fu)氨酸含量(y為脯氨酸含量,μg/mL;x為OD值) 2、按照(zhao)細菌、細胞個數(shu)或者組(zu)織鮮重計算(suan),先根(gen)據標準曲(qu)線求得y值: 細胞或細菌(jun)中脯(fu)氨酸含量(liang)(μg/104 cell)= y÷細胞(bao)濃度(104 cell/mL) Pro含量(liang)(μg/g mass) =y÷樣本鮮重(g/mL) 3、血清(qing)(漿)中(zhong)脯氨酸含量,先根據標(biao)準曲線求得y值(zhi): Pro含量[μg/mL血(xue)清(漿)] = y÷0.1mL血清(漿)/mL 注(zhu)意(yi):提取液(ye)(ye)中含有蛋白(bai)(bai)沉淀劑,提取的上(shang)清液(ye)(ye)不能用于蛋白(bai)(bai)濃(nong)度的測定。
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