土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法 土壤中性(xing)蛋白酶活性(xing)檢(jian)測試劑盒說明書 微量法
產地:北京市通州區(qu)馬駒橋聯(lian)東(dong)U谷8三(san)樓(lou) 英文名稱:Soil neutral protease activity detection kit 產品商標:solarbio 注意:正式測(ce)定(ding)之前選(xuan)擇2-3 個預(yu)期差(cha)異大的樣本做預(yu)測定。 貨(huo)號(hao):BC0275 規格(ge):100T/48S 保存與運輸:4℃保存(cun)或-20℃保存(cun); 參考價格(ge):1380 庫存(cun)狀態:現貨 關鍵詞:土壤中性蛋白酶|土壤中性蛋白酶活性檢測|蛋白酶活性檢測 產品內容(rong): 試(shi)劑一:液體(ti)20mL×1 瓶,4℃保存; 試劑(ji)二:粉劑(ji)×1 瓶(ping),4℃保存;臨用(yong)前加入10mL試劑一,沸水浴攪(jiao)拌溶解后待用(yong); 試劑三:粉劑×1 瓶(ping),4℃保存;臨(lin)用前加入10mL 蒸餾(liu)水充分(fen)溶解待用; 試劑四:液體20mL×1 瓶,4℃保存; 試劑五:液體5mL×1 瓶(ping),4℃保(bao)存(cun); 標準(zhun)品:液體1mL×1 支,0.2 μmol/mL 酪氨(an)酸溶液,4℃保存。
產品說(shuo)明: 土(tu)(tu)壤(rang)(rang)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)酶(mei)參(can)與土(tu)(tu)壤(rang)(rang)中存在的(de)(de)(de)氨基酸(suan)、蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)以及其他(ta)含蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)氮(dan)的(de)(de)(de)有機(ji)化合物的(de)(de)(de)轉化,其水(shui)解產物是高等(deng)植物的(de)(de)(de)氮(dan)源(yuan)之一。土(tu)(tu)壤(rang)(rang)中性(xing)(xing)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)酶(mei)在中性(xing)(xing)環境下催化蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)水(shui)解,與土(tu)(tu)壤(rang)(rang)有機(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)含量、氮(dan)素及其他(ta)土(tu)(tu)壤(rang)(rang)性(xing)(xing)質(zhi)(zhi)(zhi)有關。中性(xing)(xing)條(tiao)件(jian)下,土(tu)(tu)壤(rang)(rang)中性(xing)(xing)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)酶(mei)可將(jiang)酪蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)水(shui)解產生(sheng)酪氨酸(suan);在堿(jian)性(xing)(xing)條(tiao)件(jian)下,酪氨酸(suan)還原磷鉬酸(suan)化合物生(sheng)成鎢(wu)藍,在680nm 有特征吸收峰。
實驗中所需儀器及設備: 可(ke)見分(fen)光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diao)式移液(ye)槍(qiang)、微量比色皿/96孔(kong)板、甲苯、蒸餾水、50目篩(或(huo)更小)。
樣(yang)品(pin)處理: 新(xin)鮮土(tu)樣自然(ran)風干或37℃烘箱風干,過30~50 目篩(shai)。
操(cao)作步驟: 1、分(fen)光光度計/酶標儀預熱30min 以上(shang),調(diao)節(jie)波長680nm,蒸餾(liu)水調(diao)零。 2、樣(yang)本測定: 試劑(ji)名(ming)稱 測定(ding)管 對照管 標(biao)準(zhun)管 空白管 風干(gan)土樣(g) 0.05 0.05 - - 試(shi)劑一(μL) 50 50 - - 試劑二(μL) 100 - - 混勻后,37℃反應24h,期間振蕩(dang)5-6 次,使土樣(yang)與反應液充分(fen)接觸。 試劑三(san)(μL) 100 100 - - 試(shi)劑二(μL) - 100 - - 混(hun)勻(yun),10000rpm 室溫(wen)離心10min,取上(shang)清液 上清液(μL) 44 44 - - 標準液(μL) - - 44 - 蒸餾水(μL) - - - 44 試劑(ji)四(μL) 130 130 130 130 試劑(ji)五(μL) 26 26 26 26
混勻,40℃水浴10min,10000rpm 室溫(wen)離心10min,取(qu)上(shang)清液于680nm 下讀取(qu)各管(guan)吸(xi)光值A,分別記為A 測(ce)定(ding)管(guan)、A 對照管(guan)、A 標準(zhun)(zhun)(zhun)管(guan)、A 空(kong)白管(guan),計算ΔA 測(ce)定(ding)=A 測(ce)定(ding)管(guan)-A 對照管(guan),ΔA 標準(zhun)(zhun)(zhun)=A 標準(zhun)(zhun)(zhun)管(guan)-A 空(kong)白管(guan)。
注意:標準管、空白管只(zhi)需測(ce)一次。每個測(ce)定管設一個對照管。
土壤(rang)中(zhong)性蛋白酶活性計算: 單(dan)位定義:每(mei)(mei)天每(mei)(mei)g土樣中產生(sheng)1μmol 酪氨酸(suan)為一個(ge)土壤(rang)中性蛋(dan)白(bai)酶(mei)活力單位。土壤(rang)中性蛋(dan)白(bai)酶(mei)(U/g)=C標準×ΔA測定÷ΔA標準×V 反總(zong)÷W÷T= 0.05×ΔA測定÷ΔA標準÷W。 C 標準管:標準管濃度(du),0.2 μmol/mL; V 反總(zong):反應(ying)體系總(zong)體積,0.25mL; T:反應時(shi)間,1d; W:樣本質(zhi)量(liang),g。
注意事項(xiang): 1、當吸光值大于(yu)1.5時(shi)(shi),建議(yi)將上清液稀釋(shi)后(hou)進行測定,計算時(shi)(shi)注意(yi)乘以稀釋(shi)倍數。 土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法 |