脫鈣(gai)是制作骨(gu)(gu)組(zu)織(zhi)切片的(de)重要環節，尤其(qi)是要進(jin)行(xing)免疫組(zu)織(zhi)化學染(ran)色的(de)骨(gu)(gu)組(zu)織(zhi)。為達到骨(gu)(gu)組(zu)織(zhi)既充(chong)分脫鈣(gai)，又保(bao)護骨(gu)(gu)組(zu)織(zhi)中的(de)抗原不被破壞(huai)，需要對含鈣(gai)的(de)組(zu)織(zhi)固定之(zhi)后(hou)再進(jin)行(xing)脫鈣(gai)，然后(hou)再行(xing)常規(gui)制片Chemicalbook。DTA脫鈣液與羥(qian)基(ji)磷灰石(shi)結(jie)晶(jing)的外層(ceng)鈣結(jie)合，形成可溶性的非離子化合物(wu)，同時又促進(jin)晶(jing)體內層(ceng)的結(jie)合鈣向(xiang)外轉(zhuan)移。借助這種連(lian)續(xu)性的作用使羥(qian)基(ji)磷灰石(shi)晶(jing)體逐漸融解，且pH中性時(shi)可起螯合(he)作用(yong)。EDTA脫鈣液的操(cao)作步驟：
1、骨組織脫鈣時，取材不易過厚，一般大約 5mm。
2、組織固定后，用 PBS 清洗 3 次，每次 20min。
3、組織用蒸餾水洗清洗 3 次，每次 20min。
4、組織轉移 20～30 倍體積的 EDTA脫鈣液中，脫鈣 10～30 天或更長時間。如果想加快脫鈣速度，可以置于 37℃進行脫鈣。如果必要，更換新的 EDTA 脫鈣液繼續脫鈣，多數組織脫鈣 2 周～3 個月即可，每周更換一次，直終點。亦可采用微波快速脫鈣法：微波爐設在 200W 左右的檔位，每次加熱 5min，依據組織厚度和密度重復 3～5min，中間間隔 3～5min。
5、用蒸(zheng)餾水沖(chong)洗數次(ci)。
6、常規脫水、包埋。
